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qian0717新蟲 (小有名氣)
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[求助]
差異表達(dá)基因的篩選,基因芯片、數(shù)字表達(dá)譜、表達(dá)譜測序和RNA-seq 已有1人參與
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這幾個技術(shù)的區(qū)別是什么?我的理解是,基因芯片只能檢測探針設(shè)計(jì)時考慮的基因;數(shù)字表達(dá)譜和表達(dá)譜測序是一回事,測mRNA序列;RNA-seq是測所有的RNA,不只是mRNA。 我要做的物種,轉(zhuǎn)錄組有其他研究者測過了(NCBI的TSA數(shù)據(jù)庫里有contigs,約38k個contigs)。有EST序列(約8k個EST,組裝成約6k個unigene),F(xiàn)有文獻(xiàn)中有十幾例利用基因芯片篩選該物種差異表達(dá)基因的例子。這種情況下,用哪種技術(shù)好? 用基因芯片時,根據(jù)EST序列設(shè)計(jì)探針,根據(jù)轉(zhuǎn)錄組contigs設(shè)計(jì)探針,兩者檢測到的序列有什么區(qū)別?(現(xiàn)有文獻(xiàn)中有一例利用轉(zhuǎn)錄組contigs,其他全部利用EST序列) |
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目前使用最普遍的是基因芯片和RNA-seq,其中以RNA-seq最受歡迎。所以樓主說的物種被別人做過了,這一點(diǎn)也不奇怪。 RNA-seq是比基因芯片更先進(jìn)的技術(shù),其優(yōu)勢這里不多說了。既然它更先進(jìn),那么肯定是首選的技術(shù)。目前普遍的做法如下:先做轉(zhuǎn)錄組測序,尋找感興趣的基因,后續(xù)做芯片加以驗(yàn)證。兩者達(dá)到相輔相成。但是對于新的基因、新轉(zhuǎn)錄本,芯片就無能為力了。 樓主所問的用EST還是contigs設(shè)計(jì)探針,其關(guān)系類似芯片與測序。沒有好壞之分,但EST運(yùn)用更廣泛吧。 |

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