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尛苳苳金蟲 (初入文壇)
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[求助]
羧甲基茯苓多糖的滅菌問題 已有3人參與
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| 實(shí)驗(yàn)室有羧甲基茯苓多糖，想進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)，但是要滅菌，試過(guò)用0.22μm和0.45μm的濾頭，但是會(huì)堵住，高溫滅菌又會(huì)破壞多糖請(qǐng)教各位有什么好的辦法，用紫外燈可行嗎？ |
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maomao851119
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xiaoxiao270: 金幣+1, 3Q 2015-09-22 14:56:58
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xiaoxiao270: 金幣+1, 3Q 2015-09-22 14:56:58
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那就要看你滅菌后的產(chǎn)品要做什么用途了 如果對(duì)無(wú)菌要求根高的話 紫外線滅菌肯定不夠的 尤其對(duì)液體 滅菌嘛 無(wú)非就幾種方法 你的產(chǎn)品是液體 既然濕熱不行的話 最好的就是過(guò)濾了 你說(shuō)濾頭會(huì)堵 原因是什么？ 1 產(chǎn)品本身黏度很大？ 2 產(chǎn)品濃度很大？ 3 產(chǎn)品菌體太多？ 4 里面雜質(zhì)太多？ 如果是1，2 稀釋--過(guò)濾--管式超濾濃縮 對(duì)環(huán)境和操作要求挺高 如果是3，4 高速離心--0.8--0.45--0.22 可能對(duì)樣品損耗比較大 如果實(shí)在不行的話 co-60照射吧 估計(jì)對(duì)樣品影響會(huì)很大 我們之前有個(gè)類似的 做過(guò) 不行 |
2樓2015-09-22 10:19:51
尛苳苳
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3樓2015-09-22 10:48:50
maomao851119
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xiaoxiao270: 金幣+5, 3Q 2015-09-22 14:57:06
xiaoxiao270: 金幣+5, 3Q 2015-09-22 14:57:06
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我明白了 你現(xiàn)在其實(shí)還沒確定是直接將多糖固體直接滅菌 還是溶解后變成液體再滅菌是不？ 你之前說(shuō) 高溫滅菌會(huì)對(duì)他造成破壞 你這個(gè)只是做細(xì)胞毒理試驗(yàn) 我能不能理解為只要這個(gè)樣品里面活的微生物就行了？ 那么你這個(gè)樣品在多高的溫度會(huì)被破壞 ？ 破壞率是多高？ 被破壞的樣品（相當(dāng)于雜質(zhì)）對(duì)細(xì)胞毒理有沒影響？ 這些基礎(chǔ)數(shù)據(jù)應(yīng)該要有的 一般滅菌條件都是121攝氏度 -8--10分鐘 你的試驗(yàn)條件可以選擇一個(gè)遠(yuǎn)低于這個(gè)條件的滅菌方式 比如說(shuō)100度 1h 等等 如果你擔(dān)心滅菌不徹底 可以細(xì)胞培養(yǎng)的時(shí)候加點(diǎn)雙抗？ 至于說(shuō)是直接粉末滅菌 還是溶解后再滅菌 個(gè)人覺得是粉末直接滅菌的好 畢竟液體還存在一個(gè)熱穿透問題 另外 我之前做過(guò)一個(gè)多糖產(chǎn)品 分子量達(dá)到150萬(wàn) 溶解后非常黏 但是他有個(gè)特性 在一定鹽濃度存在的條件下 他的黏度會(huì)立即下降很多 不知道你這個(gè)多糖也存在這個(gè)情況 不妨試一下 溶解后加入2%左右濃度的氯化鈉 看看他的黏度有沒下降 如果有的話 過(guò)濾肯定會(huì)好很多 當(dāng)然 這必須是在不影響你后面的細(xì)胞毒理試驗(yàn)的前提下 紫外照射滅菌 這個(gè)詞本身就不對(duì) 紫外照射根本不能稱之為滅菌 充其量只能叫作消毒吧 |
4樓2015-09-22 12:53:58
xiaoying1995
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5樓2015-09-22 15:28:45
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6樓2015-09-22 21:35:35
maomao851119
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【答案】應(yīng)助回帖
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我們學(xué)校最近用了超濾技術(shù)，聽工程師說(shuō)有不同的孔徑。很多做蛋白的都在用。你可以試 --------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 超濾技術(shù) 除菌 理論上可行 但是對(duì)整體操作要求很高且費(fèi)用不小 并且要除菌 就必須保證超濾膜本身就是無(wú)菌的 光這一點(diǎn)就很頭疼 除非是那種一次性的超濾管 并且只能是截流細(xì)菌 你的多糖透出 |
7樓2015-09-23 09:37:01
lateron_cq
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