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尛苳苳金蟲 (初入文壇)
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[求助]
羧甲基茯苓多糖的滅菌問題 已有3人參與
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| 實驗室有羧甲基茯苓多糖,想進一步實驗,但是要滅菌,試過用0.22μm和0.45μm的濾頭,但是會堵住,高溫滅菌又會破壞多糖請教各位有什么好的辦法,用紫外燈可行嗎? |
至尊木蟲 (知名作家)
新蟲 (小有名氣)
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那就要看你滅菌后的產(chǎn)品要做什么用途了 如果對無菌要求根高的話 紫外線滅菌肯定不夠的 尤其對液體 滅菌嘛 無非就幾種方法 你的產(chǎn)品是液體 既然濕熱不行的話 最好的就是過濾了 你說濾頭會堵 原因是什么? 1 產(chǎn)品本身黏度很大? 2 產(chǎn)品濃度很大? 3 產(chǎn)品菌體太多? 4 里面雜質(zhì)太多? 如果是1,2 稀釋--過濾--管式超濾濃縮 對環(huán)境和操作要求挺高 如果是3,4 高速離心--0.8--0.45--0.22 可能對樣品損耗比較大 如果實在不行的話 co-60照射吧 估計對樣品影響會很大 我們之前有個類似的 做過 不行 |
金蟲 (初入文壇)
新蟲 (小有名氣)
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我明白了 你現(xiàn)在其實還沒確定是直接將多糖固體直接滅菌 還是溶解后變成液體再滅菌是不? 你之前說 高溫滅菌會對他造成破壞 你這個只是做細胞毒理試驗 我能不能理解為只要這個樣品里面活的微生物就行了? 那么你這個樣品在多高的溫度會被破壞 ? 破壞率是多高? 被破壞的樣品(相當(dāng)于雜質(zhì))對細胞毒理有沒影響? 這些基礎(chǔ)數(shù)據(jù)應(yīng)該要有的 一般滅菌條件都是121攝氏度 -8--10分鐘 你的試驗條件可以選擇一個遠低于這個條件的滅菌方式 比如說100度 1h 等等 如果你擔(dān)心滅菌不徹底 可以細胞培養(yǎng)的時候加點雙抗? 至于說是直接粉末滅菌 還是溶解后再滅菌 個人覺得是粉末直接滅菌的好 畢竟液體還存在一個熱穿透問題 另外 我之前做過一個多糖產(chǎn)品 分子量達到150萬 溶解后非常黏 但是他有個特性 在一定鹽濃度存在的條件下 他的黏度會立即下降很多 不知道你這個多糖也存在這個情況 不妨試一下 溶解后加入2%左右濃度的氯化鈉 看看他的黏度有沒下降 如果有的話 過濾肯定會好很多 當(dāng)然 這必須是在不影響你后面的細胞毒理試驗的前提下 紫外照射滅菌 這個詞本身就不對 紫外照射根本不能稱之為滅菌 充其量只能叫作消毒吧 |
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