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ImEven新蟲 (初入文壇)
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[求助]
豚鼠肝細(xì)胞剪碎用胰酶消化后用300目篩網(wǎng)過濾不了 已有2人參與
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豚鼠肝細(xì)胞眼科剪剪碎后用胰酶消化30分鐘再用300目篩網(wǎng)過濾不了，消化后有大量黏稠液，應(yīng)該是這些堵住了篩孔，求大神指點(diǎn)這些粘稠液是什么？怎么才能讓細(xì)胞順利篩過篩網(wǎng)？消化后再把粘稠液去掉過篩雖然可以順利過濾了，但是這樣一來單個(gè)細(xì)胞也被去除了吧，這樣過濾后在顯微鏡下也看不到多少細(xì)胞了…求大神指教��！ 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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ImEven
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3樓2015-09-27 11:47:14
najura
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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消化后加入DT的5倍體積的含10%FBS的完全培養(yǎng)基，輕輕混勻搖晃，中和胰酶，然后在過篩，就不會(huì)很粘稠了，必要時(shí)可以加DNAse I 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
2樓2015-09-27 11:20:14
ImEven
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4樓2015-09-27 11:49:40
najura
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【答案】應(yīng)助回帖
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ImEven: 金幣+100, ★★★★★最佳答案, 謝謝你！今天試了你的方法過濾效果非常好！ 2015-09-28 16:55:19
ImEven: 金幣+100, ★★★★★最佳答案, 謝謝你！今天試了你的方法過濾效果非常好！ 2015-09-28 16:55:19
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dt是含有0.02%edta的0.25%胰酶，在消化液中加入5倍體積的完全培養(yǎng)基（其中含有10%FBS），就不會(huì)很粘了 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
5樓2015-09-27 14:17:49
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