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ImEven新蟲 (初入文壇)
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[求助]
豚鼠肝細(xì)胞剪碎用胰酶消化后用300目篩網(wǎng)過濾不了 已有2人參與
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豚鼠肝細(xì)胞眼科剪剪碎后用胰酶消化30分鐘再用300目篩網(wǎng)過濾不了,消化后有大量黏稠液,應(yīng)該是這些堵住了篩孔,求大神指點(diǎn)這些粘稠液是什么?怎么才能讓細(xì)胞順利篩過篩網(wǎng)?消化后再把粘稠液去掉過篩雖然可以順利過濾了,但是這樣一來單個(gè)細(xì)胞也被去除了吧,這樣過濾后在顯微鏡下也看不到多少細(xì)胞了…求大神指教! 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
新蟲 (初入文壇)
新蟲 (小有名氣)
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消化后加入DT的5倍體積的含10%FBS的完全培養(yǎng)基,輕輕混勻搖晃,中和胰酶,然后在過篩,就不會(huì)很粘稠了,必要時(shí)可以加DNAse I 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
新蟲 (初入文壇)
新蟲 (小有名氣)
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dt是含有0.02%edta的0.25%胰酶,在消化液中加入5倍體積的完全培養(yǎng)基(其中含有10%FBS),就不會(huì)很粘了 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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