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xfyz102銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
溶液內(nèi)酶解方法
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做蛋白質(zhì)譜鑒定,以前做的都是膠內(nèi)酶解,現(xiàn)在有一個純的樣品,是單一酶的凍干樣品,不需要跑膠在次分離,想問一下各位做過的老師同學(xué)如果不跑膠直接做膠內(nèi)酶解應(yīng)該怎么進(jìn)行。 咨詢了一些同行,一是:6M 鹽酸胍溶解樣品,加DTT還原、加IAA烷基化、超濾脫鹽酸胍、加胰酶15h酶解, 質(zhì)譜分析; 二是:6M 尿素溶解樣品,加DTT還原、加IAA烷基化、加胰酶15h酶解。 以上兩個方法都沒有依據(jù),所以想請教一下有經(jīng)驗(yàn)的老師們用的protocol是什么,能不能給個完整版最好附帶出處來源的,50金幣感謝,在多些也可以。 謝謝。! |

金蟲 (小有名氣)
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