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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 生物科學 » 蛋白/酶 » 溶液內酶解方法
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xfyz102銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
溶液內酶解方法
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做蛋白質譜鑒定，以前做的都是膠內酶解，現(xiàn)在有一個純的樣品，是單一酶的凍干樣品，不需要跑膠在次分離，想問一下各位做過的老師同學如果不跑膠直接做膠內酶解應該怎么進行。 咨詢了一些同行，一是：6M 鹽酸胍溶解樣品，加DTT還原、加IAA烷基化、超濾脫鹽酸胍、加胰酶15h酶解， 質譜分析； 二是：6M 尿素溶解樣品，加DTT還原、加IAA烷基化、加胰酶15h酶解。 以上兩個方法都沒有依據(jù)，所以想請教一下有經(jīng)驗的老師們用的protocol是什么，能不能給個完整版最好附帶出處來源的，50金幣感謝，在多些也可以。 謝謝�。。� |
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jiafeijiafei
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- 性別: MM
- 專業(yè): 蛋白質組學
2樓2016-08-26 17:46:17
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