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cl8682535銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
紫外分光光度法測定總核酸含量
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求助各位蟲友~ 最近測定固態(tài)發(fā)酵中微生物的菌體量，運用的是“紫外分光光度法”檢測核酸含量來表征菌體量的多少，具體方法如下：茶葉中微生物核酸的提取測定方法:取0.25g干燥培養(yǎng)物, 適當研磨,加入25mL 5%的三氯乙酸溶液,于80℃水浴中提取25min,其間不斷進行攪拌,取出后冰浴冷卻,然后8000r/min,4℃離心15 min ,稀釋5倍,以5 %三氯乙酸作空白對照,于260nm處測OD值。 測OD值時遇到了麻煩，數(shù)值大幅度來回波動！  逛完各種帖后，發(fā)現(xiàn)可能原因有：（1）樣液中含有固態(tài)雜質(zhì)；(2)溶液體系不穩(wěn)定，仍有反應(yīng)進行。針對原因（1），進行了濾紙過濾，超濾膜過濾，低溫高速離心過后，未能解決問題，說明OD值的變動很有可能是原因（2）導(dǎo)致；針對原因（2），將溶液長時間靜置或者增大原液稀釋倍數(shù)，也沒能解決問題。請問各位蟲友，這種情況該如何處理？是否需要用到傳說中的穩(wěn)定劑？如果需要，怎樣才能知道是哪種穩(wěn)定劑呢？ |
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2樓2015-11-04 22:24:31
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