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cl8682535銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
紫外分光光度法測(cè)定總核酸含量
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求助各位蟲友~ 最近測(cè)定固態(tài)發(fā)酵中微生物的菌體量，運(yùn)用的是“紫外分光光度法”檢測(cè)核酸含量來(lái)表征菌體量的多少，具體方法如下：茶葉中微生物核酸的提取測(cè)定方法:取0.25g干燥培養(yǎng)物, 適當(dāng)研磨,加入25mL 5%的三氯乙酸溶液,于80℃水浴中提取25min,其間不斷進(jìn)行攪拌,取出后冰浴冷卻,然后8000r/min,4℃離心15 min ,稀釋5倍,以5 %三氯乙酸作空白對(duì)照,于260nm處測(cè)OD值。 測(cè)OD值時(shí)遇到了麻煩，數(shù)值大幅度來(lái)回波動(dòng)！  逛完各種帖后，發(fā)現(xiàn)可能原因有：（1）樣液中含有固態(tài)雜質(zhì)；(2)溶液體系不穩(wěn)定，仍有反應(yīng)進(jìn)行。針對(duì)原因（1），進(jìn)行了濾紙過(guò)濾，超濾膜過(guò)濾，低溫高速離心過(guò)后，未能解決問(wèn)題，說(shuō)明OD值的變動(dòng)很有可能是原因（2）導(dǎo)致；針對(duì)原因（2），將溶液長(zhǎng)時(shí)間靜置或者增大原液稀釋倍數(shù)，也沒(méi)能解決問(wèn)題。請(qǐng)問(wèn)各位蟲友，這種情況該如何處理？是否需要用到傳說(shuō)中的穩(wěn)定劑？如果需要，怎樣才能知道是哪種穩(wěn)定劑呢？ |
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2樓2015-11-04 22:24:31
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