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[求助]
大家?guī)兔纯磒cr的結果？還要不要做T載體鏈接和藍白斑篩選 已有2人參與
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本人小白，以前也沒做過分子實驗，屬于跨專業(yè)。導師讓做植物內生真菌的實驗，我用CTAB法提取了植物的總的DNA，用真菌的通用引物ITS1--ITS4，和真菌特異性引物ITS1F--ITS4，用20ul體系先試著跑了PCR，結果如下圖。 看文獻說擴增出來的片段應該在500-800左右，現(xiàn)在跑的可以嗎？一些論文用50ul體系跑完pcr后，進行了切膠，t載體鏈接，藍白斑篩選后才送公司去測序，也有人說可以直接拿去給公司測序？請教下大家二者的區(qū)別，麻煩幫我看下我跑的pcr圖有沒有什么問題？多謝 IMG_20151012_134424.jpg IMG_20151012_143430.jpg |
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7樓2015-10-16 23:38:51
2樓2015-10-14 18:41:15
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本帖內容被屏蔽 |
3樓2015-10-14 18:52:18
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感謝回帖！我用的marker是2000的，marker確實沒跑好，聽取你的意見下次重新?lián)Q下電泳液。我想再問下，目的片段在500—800bp間，可是這個區(qū)間的條帶好像都連在一起，沒怎么跑開，那切膠時，可以一起切下，然后在菌液pcr時，再用通用引物篩選嗎？還是說切膠時就要把那些條帶切開（感覺挨得太近了）？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2015-10-15 00:37:17
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