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請(qǐng)大家看一下這張電泳圖
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新手求教！ 1、用16SrDNA通用引物，細(xì)菌基因組總DNA為模板， 2、普通PCR 50微升體系、模板2微升，引物上下游各1微升， 退火溫度56°C（看到文獻(xiàn)，沒(méi)有做溫度梯度） 3、電壓 110V 時(shí)間40分鐘 2、引物序列： 16SrDNA 338F:CGCCCGCCGCGCGCGGCGGGCGGGGCGGGGGCACGGGGGG CCTACGGGAGGCAGCAG 518R:ATTACCGCGGCTGCTCC 3、左一MARKER跑的很清楚 500-25BP 依次是 500 400 300 200 150 100 75 50 25 4、條帶最上方有可能是加樣的時(shí)候飄出來(lái)造成的，做出來(lái)沒(méi)有看到目的條帶，求大神講解！ 電泳圖.jpg |
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肥貓p
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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2樓2015-10-15 21:38:10
3樓2015-10-15 22:59:51
馬小瓜
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
runye2015: 金幣+3 2015-10-16 13:58:33
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
runye2015: 金幣+3 2015-10-16 13:58:33
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是不是總DNA有問(wèn)題？總DNA有跑過(guò)電泳嗎？條帶清晰嗎？什么時(shí)候提取的？是—80保存嗎？ 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶(hù)端 |
4樓2015-10-15 23:10:21
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DNA是三個(gè)月前提取得，提取完以后就一直在零下八十度冰箱保存，近半個(gè)月拿用這個(gè)做模板做熒光定量，用別的引物能擴(kuò)條帶，拿出來(lái)以后再零下20度保存的 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
5樓2015-10-16 14:02:36
6樓2015-10-16 16:53:09
商家已經(jīng)主動(dòng)聲明此回帖可能含有宣傳內(nèi)容
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
myprayer: 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-10-16 20:27:59
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
myprayer: 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-10-16 20:27:59
| 建議重新設(shè)計(jì)一條短些的引物，重新做個(gè)PCR，看看能否擴(kuò)增出來(lái)，兩個(gè)目的：1，看看是否是基因組DNA的問(wèn)題；2，如果能夠擴(kuò)增出來(lái)的話(huà)，可以再以擴(kuò)增產(chǎn)物為模板，用你的這對(duì)引物擴(kuò)增。可能會(huì)容易些�？梢月�(lián)系我們www.tolobio.com；或者support@tolobio.com |
7樓2015-10-16 17:00:28
馬小瓜
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
runye2015: 金幣+5 2015-10-16 20:44:13
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
runye2015: 金幣+5 2015-10-16 20:44:13
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你可以將總dna跑下電泳，確保模版沒(méi)有問(wèn)題，然后檢查引物的情況 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶(hù)端 |
8樓2015-10-16 20:42:41
9樓2015-10-16 20:44:27
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