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[交流]
請大家看一下這張電泳圖
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新手求教！ 1、用16SrDNA通用引物，細(xì)菌基因組總DNA為模板， 2、普通PCR 50微升體系、模板2微升，引物上下游各1微升， 退火溫度56°C（看到文獻(xiàn)，沒有做溫度梯度） 3、電壓 110V 時間40分鐘 2、引物序列： 16SrDNA 338F:CGCCCGCCGCGCGCGGCGGGCGGGGCGGGGGCACGGGGGG CCTACGGGAGGCAGCAG 518R:ATTACCGCGGCTGCTCC 3、左一MARKER跑的很清楚 500-25BP 依次是 500 400 300 200 150 100 75 50 25 4、條帶最上方有可能是加樣的時候飄出來造成的，做出來沒有看到目的條帶，求大神講解！ 電泳圖.jpg |
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DNA是三個月前提取得，提取完以后就一直在零下八十度冰箱保存，近半個月拿用這個做模板做熒光定量，用別的引物能擴(kuò)條帶，拿出來以后再零下20度保存的 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2015-10-16 14:02:36
肥貓p
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 94 (初中生)
- 金幣: 2763.1
- 散金: 145
- 紅花: 10
- 帖子: 340
- 在線: 189.3小時
- 蟲號: 1709733
- 注冊: 2012-03-22
- 專業(yè): 微生物資源與分類學(xué)
2樓2015-10-15 21:38:10
3樓2015-10-15 22:59:51
★ ★ ★ ★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
runye2015: 金幣+3 2015-10-16 13:58:33
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
runye2015: 金幣+3 2015-10-16 13:58:33
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是不是總DNA有問題？總DNA有跑過電泳嗎？條帶清晰嗎？什么時候提取的？是—80保存嗎？ 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
4樓2015-10-15 23:10:21
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