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wyfdgg新蟲 (初入文壇)
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[交流]
畢赤酵母表達脂肪酶基因 已有2人參與
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我是利用Ppic9k來轉(zhuǎn)化畢赤酵母的，連入基因之后再用BglII酶切，然后電轉(zhuǎn)畢赤酵母細胞�；虻拈L度在1000-2000之間。 轉(zhuǎn)化后在RDB平板上面涂板，有很多個白色的單克隆。然后用YPD洗板在突細胞懸液到Y(jié)PD遺傳霉素平板上面，我用的遺傳霉素濃度為1g/l、2g/l、3g/l、4g/l。但是即使是4g/l的平板上面長出來的單克隆，提取基因組DNA之后做PCR驗證，大部分也不能批到目的條帶。少數(shù)含有目的條帶的菌株進行產(chǎn)酶培養(yǎng)的時候，幾乎沒有酶活。而且跑SDS-PAGE時，也看不到蛋白條帶。 |
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2樓2015-11-04 16:13:01
wyfdgg
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3樓2015-11-12 09:49:13
justsangsue
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- 專業(yè): 藥理學(xué)
4樓2015-11-27 09:37:37
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