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[交流]
雙酶切鑒定
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| 轉(zhuǎn)DH5a后,菌液渾濁正常,菌液PCR鑒定顯示有目的基因條帶,然而雙酶切鑒定的時候為什么沒有目的條帶,只有最上邊的條帶,重復幾次未果,想知道搖起來的菌是什么東西? |

木蟲 (職業(yè)作家)
鐵蟲 (初入文壇)
鐵桿木蟲 (著名寫手)
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這個存在以下情況:1,轉(zhuǎn)基因的大腸桿菌是否陽性,經(jīng)菌液pcr鑒定,陽性方可酶切。2,提取的質(zhì)粒是否有問題,譬如震蕩劇烈,斷裂之類的。3,酶切位點要合適確認是否正確,此外還需考慮雙酶切兩個酶的酶切效率,若還是不行可以使用單酶切,分兩步進行。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |

銀蟲 (初入文壇)
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這種情況說明沒有酶切開,可以直接提取質(zhì)粒送去測序,再比對就行了,畢竟是鑒定不需要執(zhí)著酶切一種辦法。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |

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