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寧?kù)o致遠(yuǎn)131金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[交流]
雙酶切鑒定
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| 轉(zhuǎn)DH5a后，菌液渾濁正常，菌液PCR鑒定顯示有目的基因條帶，然而雙酶切鑒定的時(shí)候?yàn)槭裁礇](méi)有目的條帶，只有最上邊的條帶，重復(fù)幾次未果，想知道搖起來(lái)的菌是什么東西？ |
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6樓2015-11-01 11:59:13
mcxiaomu1023
鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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2樓2015-11-01 09:17:10
jiangronglu
鐵桿木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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- 性別: GG
- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
寧?kù)o致遠(yuǎn)131: 金幣+3 2015-11-08 07:30:49
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
寧?kù)o致遠(yuǎn)131: 金幣+3 2015-11-08 07:30:49
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這個(gè)存在以下情況：1，轉(zhuǎn)基因的大腸桿菌是否陽(yáng)性，經(jīng)菌液pcr鑒定，陽(yáng)性方可酶切。2，提取的質(zhì)粒是否有問(wèn)題，譬如震蕩劇烈，斷裂之類的。3，酶切位點(diǎn)要合適確認(rèn)是否正確，此外還需考慮雙酶切兩個(gè)酶的酶切效率，若還是不行可以使用單酶切，分兩步進(jìn)行。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
3樓2015-11-01 10:16:31
rogerqiu
銀蟲(chóng) (初入文壇)
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- 性別: GG
- 專業(yè): 植物病理學(xué)
★
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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這種情況說(shuō)明沒(méi)有酶切開(kāi)，可以直接提取質(zhì)粒送去測(cè)序，再比對(duì)就行了，畢竟是鑒定不需要執(zhí)著酶切一種辦法。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
4樓2015-11-01 11:36:34
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