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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » PCR相關 » 雙酶切鑒定
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雙酶切鑒定
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| 轉(zhuǎn)DH5a后，菌液渾濁正常，菌液PCR鑒定顯示有目的基因條帶，然而雙酶切鑒定的時候為什么沒有目的條帶，只有最上邊的條帶，重復幾次未果，想知道搖起來的菌是什么東西？ |
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sonny
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2樓2015-11-01 09:17:10
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寧靜致遠131: 金幣+3 2015-11-08 07:30:49
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寧靜致遠131: 金幣+3 2015-11-08 07:30:49
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這個存在以下情況：1，轉(zhuǎn)基因的大腸桿菌是否陽性，經(jīng)菌液pcr鑒定，陽性方可酶切。2，提取的質(zhì)粒是否有問題，譬如震蕩劇烈，斷裂之類的。3，酶切位點要合適確認是否正確，此外還需考慮雙酶切兩個酶的酶切效率，若還是不行可以使用單酶切，分兩步進行。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2015-11-01 10:16:31
rogerqiu
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這種情況說明沒有酶切開，可以直接提取質(zhì)粒送去測序，再比對就行了，畢竟是鑒定不需要執(zhí)著酶切一種辦法。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2015-11-01 11:36:34
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