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風(fēng)鈴永不孤單銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象， 已有2人參與
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前天的時(shí)候，我用凍融后的DNA模板，抽取1ul稀釋20倍，進(jìn)行PCR擴(kuò)增后，進(jìn)行瓊脂糖電泳，發(fā)現(xiàn)有幾個(gè)樣品擴(kuò)增的比較弱，重新擴(kuò)增后，還是較弱。分析原因可能是原始的DNA樣品在凍融后可能會(huì)出現(xiàn)DNA分布不均勻現(xiàn)象。 今天，對原始DNA樣板進(jìn)行重新稀釋20倍（原始DNA樣板凍融后，充分混合，抽取1ul稀釋20倍），進(jìn)行PCR擴(kuò)增后，進(jìn)行瓊脂糖電泳。果然都擴(kuò)出來了，而且特別的亮。但是問題又來了，拖尾比較嚴(yán)重，敢問哪位知道造成這種情況的原因是什么？？？附上圖 1.jpg |
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luckydog52
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擴(kuò)增的問題我就不說了。你看你的Marker也拖尾，說明電泳過程有問題。 1.你的膠太薄了，多加點(diǎn)。 2.上樣量太多，減去一半試試 3.配膠的和電泳的電泳液換換新的， 4.電壓低點(diǎn) 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
9樓2015-11-21 14:01:41
風(fēng)鈴永不孤單
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2樓2015-11-20 21:17:36
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3樓2015-11-20 21:22:14
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4樓2015-11-20 21:24:50
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