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臨江弦新蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
色譜柱柱壓沖柱時(shí)越來(lái)越高 已有12人參與
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我用的waters symmetrysheild RP18的色譜柱，流動(dòng)相是含辛烷硫酸鈉1g/t的0.05M磷酸二氫鉀溶液和有機(jī)相，流速0.8 ml/min,先用40乙腈和60水0.8ml/min沖柱，再過(guò)度到100%甲醇，柱壓越來(lái)越高，感覺(jué)柱子堵了，每次都柱壓高到漏液，然后峰型徹底就不行了，峰型分叉，每次都這樣，新柱子也毀了，大家能告訴我是什么原因嗎 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
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2樓2015-11-21 15:51:41
賑早見(jiàn)琥珀主
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先說(shuō)柱壓，從你說(shuō)的情況來(lái)看應(yīng)該是鹽堵了，60%的水并不算合適，帶鹽流動(dòng)相沖洗的時(shí)候肯定要用90%左右的水去沖洗才能將殘留的鹽完全沖洗干凈；其次峰型分叉，因?yàn)槟悻F(xiàn)在里面還是堵的，所以不好說(shuō)柱子有沒(méi)有徹底壞掉，但是有一點(diǎn)，離子對(duì)試劑本身會(huì)對(duì)色譜柱造成不可逆的傷害，且會(huì)縮短色譜柱的使用壽命，用的時(shí)間久了柱效自然會(huì)降低到不可接受的程度。 目前還是建議你好好沖洗色譜柱，具體方法是90%的水，0.2~0.3ml/min流速過(guò)夜沖洗，等這個(gè)壓力正常了再緩緩切換到甲醇進(jìn)行沖洗。如果過(guò)夜沖并不能使壓力恢復(fù)正常，柱壓還高，找會(huì)拆柱子的，把柱篩板拆下來(lái)超聲清洗（慎用這一步，對(duì)色譜柱傷害比較大） |
10樓2015-11-22 22:50:01
3樓2015-11-21 22:43:42
靜謐limi
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4樓2015-11-21 23:19:41
臨江弦
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5樓2015-11-22 15:53:41
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6樓2015-11-22 15:55:52
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貌似你過(guò)渡的流動(dòng)相有機(jī)溶劑比例有點(diǎn)高。我們一般用甲醇:水=2:8,至少?zèng)_1h再換純甲醇。這款柱子好像對(duì)無(wú)機(jī)鹽很敏感。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
7樓2015-11-22 16:43:22
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1你用的什么液相，安捷倫1260系列含鹽流動(dòng)相必須在下面的管路，沃特斯一般沒(méi)有要求，你看的梯度混合的位置。 2你的有機(jī)相用的是什么，磷酸鹽非常容易結(jié)晶和生長(zhǎng)微生物，我們一般先用10%有機(jī)相沖洗半小時(shí)，稀釋柱子和機(jī)器內(nèi)的鹽，然后用100%的有機(jī)相保存柱子，而且一個(gè)柱子只用一種或類似的流動(dòng)相 3我們不用乙腈和甲醇混合沖洗柱子，這個(gè)是老師定的，我也不知道 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
8樓2015-11-22 17:23:34
9樓2015-11-22 17:25:32
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