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[求助]
TA克隆的時候,含目的片段的質(zhì)粒和不含目的片段的質(zhì)粒會進(jìn)入同一個感受態(tài)細(xì)胞中嗎 已有3人參與
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| RT,菌落PCR,挑單菌落PCR發(fā)現(xiàn),用M13通用引物PCR,出來2條片段,根據(jù)大小判定一個是含有目的片段的結(jié)果,一個是不含目的片段的結(jié)果,含目的片段的質(zhì)粒和不含目的片段的質(zhì)粒會進(jìn)入同一個感受態(tài)細(xì)胞中嗎 |
新蟲 (著名寫手)
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一個轉(zhuǎn)化子,這一小堆菌里提出的質(zhì)粒,我覺得占主要的還是你的連上的那個,你可以將這個菌進(jìn)行擴(kuò)培養(yǎng)再提質(zhì)粒那樣濃度就高了對嗎?一開始挑的轉(zhuǎn)化子長得菌的量只是粗略讓你判斷是否連上了,如果你覺得連上了,就切一下,再次確認(rèn)一下,或者 pcr 你的質(zhì)粒是否有目的片段。只有驗(yàn)證成功了才會擴(kuò)培酶切回收。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |

新蟲 (初入文壇)
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可以出現(xiàn)啊,你想如果酶切不完全,或者僅僅是單酶切,陽性質(zhì)粒和重組質(zhì)粒都存在,這種概率是有的。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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