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18761615793木蟲 (正式寫手)
小蟲
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[求助]
急急急，在線等，關(guān)于蛋白體外活性檢測的問題
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| 蛋白體外活性檢測的方法有哪些，具體操作是什么，原理是什么，謝謝，如有幫助發(fā)金幣 |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
18761615793: 金幣+20, ★★★★★最佳答案, 很有幫助 2015-12-08 10:06:26
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體外的蛋白活力檢測主要分為結(jié)合和功能兩方面。 結(jié)合：就是蛋白和目的靶點之間的結(jié)合能力的強弱，這個其實是測量可逆反應(yīng)過程中的蛋白和目的靶點的解離平衡常數(shù)。一般會用同位素檢測或者ELISA進行，你可以搜索Ligand-Binding Assay，能夠找到不少資料。 功能是建立在結(jié)合的基礎(chǔ)之上的，功能學(xué)實驗主要集中在細(xì)胞水平，蛋白和目的靶點結(jié)合后，引起了細(xì)胞體內(nèi)的信號應(yīng)答，使細(xì)胞的某些功能得到增強或者抑制等.比如ADCC,抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用（antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity ）是指表達(dá)IgGFc受體的NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞等，通過與已結(jié)合在病毒感染細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞等靶細(xì)胞表面的IgG抗體的Fc段結(jié)合，而殺傷這些靶細(xì)胞的作用。IgG抗體可介導(dǎo)這些細(xì)胞發(fā)揮ADCC作用，其中NK細(xì)胞是能發(fā)揮ADCC作用的主要細(xì)胞。在抗體介導(dǎo)的ADCC作用的發(fā)生過程中，抗體只能與靶細(xì)胞上的相應(yīng)抗原表位特異性結(jié)合，而NK細(xì)胞等效應(yīng)細(xì)胞可殺傷任何已與抗體結(jié)合的靶細(xì)胞，故抗體與靶細(xì)胞上的抗原結(jié)合是特異性的，NK細(xì)胞等對靶細(xì)胞的殺傷作用是非特異性的。 |
187616157932樓2015-12-07 19:09:39
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3樓2015-12-08 10:08:38
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4樓2015-12-09 14:17:46
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6樓2015-12-09 20:23:30
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18761615793: 金幣+20, ★★★★★最佳答案, 非常感謝 2015-12-09 22:03:14
18761615793: 金幣+20, ★★★★★最佳答案, 非常感謝 2015-12-09 22:03:14
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結(jié)合你得明白KD的概念，可以搜索一下ligand-binding assay，，能夠得到不少資料，先看些基礎(chǔ)的資料。蛋白引起的功能可能有多種，最簡單的是蛋白和細(xì)胞作用后，把細(xì)胞殺死了，根據(jù)加入蛋白的越多細(xì)胞死亡的越多，通過檢測活細(xì)胞的數(shù)目來檢測蛋白的效果。MTT或者結(jié)晶紫都是測量活細(xì)胞多少的手段。 |
7樓2015-12-09 20:29:12
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8樓2015-12-09 22:08:57
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這看什么細(xì)胞了，腫瘤細(xì)胞掛了那就是蛋白活性好，正常細(xì)胞掛了那就是蛋白有毒性。MTT測的是細(xì)胞活力，你搜索一下MTT的作用原理就明白了 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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9樓2015-12-09 22:16:52
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10樓2015-12-10 08:52:34
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