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srr1990新蟲 (初入文壇)
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[求助]
釀酒酵母破壁 已有4人參與
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請問各位,有沒有用釀酒酵母系統(tǒng)做蛋白表達(dá)的?我的是胞內(nèi)表達(dá),需要破壁,之前查過很多資料,用超聲波也試過,破不開。之后用的是酸洗玻璃珠,感覺效果還不錯。我不知道小蟲子們都是怎么破壁的,因為要測酶活,所以還要保持蛋白的酶活性。我想知道你們都是怎么知道破壁完全的?難道都是破完后用SDS-PAGE檢測看是否有條帶? 還有,我破壁都是用實驗室一般的渦旋振蕩器,也就震蕩10min左右,都是手動的,而且量也很少,每次破完上清也就200-300ul左右,怕再多破碎效果不好。請教各位,你們有沒有比較好的方法? |

金蟲 (正式寫手)
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高溫高壓反應(yīng)求助
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