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SDS-PAGE的主要應(yīng)用在生活中有哪些？
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SDS-PAGE因易于操作，而具有廣泛的用途，是許多研究領(lǐng)域的重要的分析技術(shù)。 1. 蛋白質(zhì)純度分析； 2. 蛋白質(zhì)分析量的測(cè)定，根據(jù)遷移率大小測(cè)定蛋白質(zhì)亞基的分子量； 3. 蛋白質(zhì)濃度的測(cè)定； 4. 蛋白質(zhì)水解的分析； 5. 免疫沉淀蛋白的鑒定； 6.SDS-PAGE SDS-PAGE 分子量 蛋白質(zhì) 7. 蛋白質(zhì)修飾的鑒定； 8. 分離和濃縮用于產(chǎn)生抗體的抗原； 9. 分離放射性標(biāo)記的蛋白質(zhì)； 10. 顯示小分子多肽。 SDS-PAGE有效分離范圍取決于聚丙烯酰胺的濃度和交聯(lián)度，其孔徑隨著雙丙烯酰胺與丙烯酰胺比率的增加而減小，比率接近于1：20時(shí)，孔徑達(dá)到最小值。分子量低于10kD的小分子肽類，即使用較高濃度的聚丙烯酰胺凝膠的SDS-PAGE也不能完全分離，或是顯不出色，或是顯帶較弱，帶型彌散。且分子量越小，效果也越差。 為了能在SDS-PAGE上顯示測(cè)定小分子量的多肽，通常采取兩種方法：一是增加凝膠的濃度和交聯(lián)度，在制膠時(shí)加入一些可以降低聚丙烯酰胺凝膠網(wǎng)限孔徑的溶質(zhì)分子，使用尿素、甘油或蔗糖等物質(zhì)；二是選擇緩沖液中的拖尾離子的種類和濃度以達(dá)到改善多肽的分離效果。 原文地址：生物秀 |
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