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SDS-PAGE的主要應(yīng)用在生活中有哪些？
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SDS-PAGE因易于操作，而具有廣泛的用途，是許多研究領(lǐng)域的重要的分析技術(shù)。 1. 蛋白質(zhì)純度分析； 2. 蛋白質(zhì)分析量的測定，根據(jù)遷移率大小測定蛋白質(zhì)亞基的分子量； 3. 蛋白質(zhì)濃度的測定； 4. 蛋白質(zhì)水解的分析； 5. 免疫沉淀蛋白的鑒定； 6.SDS-PAGE SDS-PAGE 分子量 蛋白質(zhì) 7. 蛋白質(zhì)修飾的鑒定； 8. 分離和濃縮用于產(chǎn)生抗體的抗原； 9. 分離放射性標(biāo)記的蛋白質(zhì)； 10. 顯示小分子多肽。 SDS-PAGE有效分離范圍取決于聚丙烯酰胺的濃度和交聯(lián)度，其孔徑隨著雙丙烯酰胺與丙烯酰胺比率的增加而減小，比率接近于1：20時，孔徑達到最小值。分子量低于10kD的小分子肽類，即使用較高濃度的聚丙烯酰胺凝膠的SDS-PAGE也不能完全分離，或是顯不出色，或是顯帶較弱，帶型彌散。且分子量越小，效果也越差。 為了能在SDS-PAGE上顯示測定小分子量的多肽，通常采取兩種方法：一是增加凝膠的濃度和交聯(lián)度，在制膠時加入一些可以降低聚丙烯酰胺凝膠網(wǎng)限孔徑的溶質(zhì)分子，使用尿素、甘油或蔗糖等物質(zhì)；二是選擇緩沖液中的拖尾離子的種類和濃度以達到改善多肽的分離效果。 原文地址：生物秀 |
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