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遠(yuǎn)麗123金蟲 (小有名氣)
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[求助]
同源重組的方法敲除目的基因 已有4人參與
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我要對一個基因進(jìn)行敲除,是利用同源重組的方法敲除目的基因,將兩端同源臂搭起來構(gòu)建重組質(zhì)粒,后來送去測序 發(fā)現(xiàn)了有一個堿基錯了 可能發(fā)生了點(diǎn)突變 請問各位大神 我還可以用這個用這個重組質(zhì)粒進(jìn)行下面實(shí)驗(yàn)嗎 只是一個堿基錯了 應(yīng)該不會有太大影響吧 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
金蟲 (小有名氣)
木蟲 (正式寫手)
新蟲 (初入文壇)
金蟲 (小有名氣)
木蟲 (正式寫手)
新蟲 (小有名氣)
| 用于基因敲除沒問題。你關(guān)注的是目的基因去除,一個堿基不會影響同源重組;一般情況下,你敲除的基因與其臨近的基因應(yīng)該有一定的距離,其上游和下游片段(也就1kb吧)應(yīng)該只關(guān)系到目標(biāo)基因,那單堿基的改變不應(yīng)影響其它基因。重組后,目標(biāo)基因被篩選標(biāo)記基因替換掉,也不會影響篩選標(biāo)記基因。我做的基因敲除還沒測過上下游片段的序列。 |
金蟲 (小有名氣)
金蟲 (小有名氣)
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多謝你的回答 對我很有用 測序出來的下游與我原序列相比多了一個堿基 我是擔(dān)心會不會影響到下面一個基因的表達(dá) 應(yīng)該不會有太大影響吧 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
鐵桿木蟲 (著名寫手)
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