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[求助]
FITC標(biāo)記的二抗和HRP標(biāo)記的二抗有什么區(qū)別？ 已有3人參與
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| FITC標(biāo)記的二抗和HRP標(biāo)記的二抗有什么區(qū)別？ |
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3樓2015-12-15 20:59:22
2樓2015-12-15 20:59:09
yyy0305
至尊木蟲 (著名寫手)
- BioEPI: 2
- 應(yīng)助: 114 (高中生)
- 金幣: 9560.5
- 散金: 50
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- 帖子: 1481
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- 性別: GG
- 專業(yè): 生物技術(shù)藥物
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
| FITC為熒光基團(tuán)，,最大吸收光波長(zhǎng)為490～495nm,最大發(fā)射光波長(zhǎng)為520～530nm,呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光。如果FITC標(biāo)記的二抗和一抗結(jié)合上了，去除沒有結(jié)合一抗的FITC標(biāo)記的二抗，就可以直接進(jìn)行熒光讀數(shù)了，產(chǎn)生的熒光信號(hào)就代表一抗二抗結(jié)合在一起的量。HRP為辣根過氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP），其本身并不產(chǎn)生信號(hào)，需要另外加入該酶的底物如TMB后，催化底物產(chǎn)生有信號(hào)的產(chǎn)物，多一步加底物顯色的過程。FITC讀數(shù)需要一起能夠讀熒光（fluorescence ）的功能，而用HRP顯色需要另外購(gòu)置底物，底物不一樣讀數(shù)的方式也不一樣，TMB讀吸光度absorbance，另外的底物Amplex Red也能夠讀熒光fluorescence或者其他底物讀化學(xué)發(fā)光Luminescence |
4樓2015-12-15 21:44:07
5樓2015-12-15 21:44:28
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