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bbsoslolita銀蟲 (小有名氣)
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還原響應載藥膠束體外釋放實驗總是失敗-釋放率很低。 已有2人參與
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大家好,最近我一直在做還原響應的載藥膠束的體外緩釋實驗,但是結果都很不好,在還原性條件下的和不在還原性條件下的、具有還原響應性和不具還原響應性的膠束的釋放率都差不多,而且DTT做的釋放率很低,48h還不到10%。 我的實驗方法: 4mL 1mg/mL的載藥膠束溶液裝入透析袋,透析袋外面加46mL PBS7.4透析液,DTT作為還原劑,濃度為0,或者是10mM。 實驗在37攝氏度下進行,透析袋方面放置了攪拌子攪拌,每隔一段時間取樣,補充透析液。樣品測試UV,繪制成緩釋曲線。 我不知道是不是由以下原因引起的: 1. 膠束溶液濃度太高,導致DOX釋放不出來,或者是擴散地很慢。我看文獻上有跟我差不多的,1mg/mL,也有很低的,0.025mg/mL。我是用UV測DOX釋放量的,在1mg/mL的濃度下UV的測試已經(jīng)捉襟見肘了,如果要在極低濃度下進行,恐怕要用熒光光譜儀來測試。 2. 沒有使用搖床,因為沒有條件,所以改成了透析袋外攪拌子攪拌,我的膠束是由兩親性的聚合物構成的,疏水端由二硫鍵交聯(lián)。打開交聯(lián)后,親疏水聚合物可能還是組成膠束,沒有解離,再加上沒有搖床震蕩,所以藥物出來很慢。 3. 還原劑的問題。最初使用的是GSH來還原,但是發(fā)現(xiàn)透析液中會出現(xiàn)白色絮狀的沉淀,可能是GSH在37攝氏度下會變質,這沉淀影響了紫外吸收,抬高了基線,使得釋放率超出了理論值。后來我改成了DTT,發(fā)現(xiàn)DTT做出來的釋放率很低,48h不到10%,還沒有GSH做出來的高(48h 30%左右,但沒有排除沉淀吸收的影響),就算是沒有加DTT的都有4%,難道是DTT變質了? 問題比較麻煩,請了解的蟲友和前輩多多指點,感激不盡。 |
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