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bbsoslolita銀蟲(chóng) (小有名氣)
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還原響應(yīng)載藥膠束體外釋放實(shí)驗(yàn)總是失敗-釋放率很低。 已有2人參與
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大家好，最近我一直在做還原響應(yīng)的載藥膠束的體外緩釋實(shí)驗(yàn)，但是結(jié)果都很不好，在還原性條件下的和不在還原性條件下的、具有還原響應(yīng)性和不具還原響應(yīng)性的膠束的釋放率都差不多，而且DTT做的釋放率很低，48h還不到10%。 我的實(shí)驗(yàn)方法： 4mL 1mg/mL的載藥膠束溶液裝入透析袋，透析袋外面加46mL PBS7.4透析液，DTT作為還原劑，濃度為0，或者是10mM。 實(shí)驗(yàn)在37攝氏度下進(jìn)行，透析袋方面放置了攪拌子攪拌，每隔一段時(shí)間取樣，補(bǔ)充透析液。樣品測(cè)試UV，繪制成緩釋曲線。 我不知道是不是由以下原因引起的： 1. 膠束溶液濃度太高，導(dǎo)致DOX釋放不出來(lái)，或者是擴(kuò)散地很慢。我看文獻(xiàn)上有跟我差不多的，1mg/mL,也有很低的，0.025mg/mL。我是用UV測(cè)DOX釋放量的，在1mg/mL的濃度下UV的測(cè)試已經(jīng)捉襟見(jiàn)肘了，如果要在極低濃度下進(jìn)行，恐怕要用熒光光譜儀來(lái)測(cè)試。 2. 沒(méi)有使用搖床，因?yàn)闆](méi)有條件，所以改成了透析袋外攪拌子攪拌，我的膠束是由兩親性的聚合物構(gòu)成的，疏水端由二硫鍵交聯(lián)。打開(kāi)交聯(lián)后，親疏水聚合物可能還是組成膠束，沒(méi)有解離，再加上沒(méi)有搖床震蕩，所以藥物出來(lái)很慢。 3. 還原劑的問(wèn)題。最初使用的是GSH來(lái)還原，但是發(fā)現(xiàn)透析液中會(huì)出現(xiàn)白色絮狀的沉淀，可能是GSH在37攝氏度下會(huì)變質(zhì)，這沉淀影響了紫外吸收，抬高了基線，使得釋放率超出了理論值。后來(lái)我改成了DTT，發(fā)現(xiàn)DTT做出來(lái)的釋放率很低，48h不到10%，還沒(méi)有GSH做出來(lái)的高（48h 30%左右，但沒(méi)有排除沉淀吸收的影響），就算是沒(méi)有加DTT的都有4%，難道是DTT變質(zhì)了？ 問(wèn)題比較麻煩，請(qǐng)了解的蟲(chóng)友和前輩多多指點(diǎn)，感激不盡。 |
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7樓2016-01-11 21:36:58
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