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seraphlx新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
求助TA克隆板子長(zhǎng)好多克隆,均是假陽(yáng)性怎么回事及易錯(cuò)PCR有時(shí)候擴(kuò)不出片段 已有1人參與
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| 我用taq酶做易錯(cuò)PCR,片段3150kb,用pEASY-T1 載體,連接按照要求,每次轉(zhuǎn)化板子都長(zhǎng)的不少,也不是那種成片的,但是均假陽(yáng)性,已經(jīng)做好久了,而且擴(kuò)片段用過(guò)不同引物,不存在引物的問(wèn)題。板子基本每次連接都是新倒的Amp板。為什么片段沒(méi)連進(jìn)去還是長(zhǎng)好多克。縋CR產(chǎn)物是回收的。還有做易錯(cuò)PCR,好多時(shí)候擴(kuò)不出片段來(lái)又是怎么回事? |
新蟲(chóng) (初入文壇)
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