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wjy1991311鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
求助微生物胞內(nèi)蛋白濃度以及SOD測(cè)定問(wèn)題
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本人最近在整理學(xué)姐留下的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)， 實(shí)驗(yàn)背景是用一種抑菌物質(zhì)處理金黃色葡萄球菌，測(cè)定了它的SOD、MDA、CAT過(guò)氧化指標(biāo)以及胞內(nèi)蛋白含量變化情況，由于本人是做蛋白質(zhì)組學(xué)的，對(duì)于這些指標(biāo)正常與否不甚了解，在這里有幾個(gè)問(wèn)題請(qǐng)教下各位蟲(chóng)友，問(wèn)題如下： 1、在測(cè)定SOD、MDA、CAT數(shù)值之前需要進(jìn)行粗酶液的提取，測(cè)定粗酶液的蛋白含量，請(qǐng)問(wèn)這里不需要加PMSF等蛋白酶抑制劑么？菌體PBS溶解了以后，超聲破碎，離心后，上清液就能測(cè)定蛋白濃度了？ 2、我學(xué)姐留下的數(shù)據(jù)顯示，沒(méi)被抑菌物質(zhì)處理的菌體胞內(nèi)蛋白濃度還不到1mg/ml，我以前跑電泳之前，提取金黃色葡萄球菌全蛋白時(shí)候，都需要加PMSF蛋白酶抑制劑，尿素，硫脲一系列化學(xué)實(shí)際組成的裂解液，測(cè)定的濃度基本都在10mg/ml以上，請(qǐng)問(wèn)金黃色葡萄球菌胞內(nèi)蛋白濃度1mg/ml正常么？ 希望各位蟲(chóng)友不吝賜教。 |
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