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[求助]
求助微生物胞內蛋白濃度以及SOD測定問題
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本人最近在整理學姐留下的實驗數(shù)據(jù)， 實驗背景是用一種抑菌物質處理金黃色葡萄球菌，測定了它的SOD、MDA、CAT過氧化指標以及胞內蛋白含量變化情況，由于本人是做蛋白質組學的，對于這些指標正常與否不甚了解，在這里有幾個問題請教下各位蟲友，問題如下： 1、在測定SOD、MDA、CAT數(shù)值之前需要進行粗酶液的提取，測定粗酶液的蛋白含量，請問這里不需要加PMSF等蛋白酶抑制劑么？菌體PBS溶解了以后，超聲破碎，離心后，上清液就能測定蛋白濃度了？ 2、我學姐留下的數(shù)據(jù)顯示，沒被抑菌物質處理的菌體胞內蛋白濃度還不到1mg/ml，我以前跑電泳之前，提取金黃色葡萄球菌全蛋白時候，都需要加PMSF蛋白酶抑制劑，尿素，硫脲一系列化學實際組成的裂解液，測定的濃度基本都在10mg/ml以上，請問金黃色葡萄球菌胞內蛋白濃度1mg/ml正常么？ 希望各位蟲友不吝賜教。 |
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