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hgq115金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
求助關(guān)于紫外分光光度計(jì)檢測(cè)蛋白OD280 已有3人參與
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| PAGE蛋白電泳結(jié)果顯示無(wú)任何蛋白條帶，紫外分光光度計(jì)檢測(cè)蛋白濃度達(dá)到5.8mg/ml，檢測(cè)樣本緩沖液組分未知，懷疑是緩沖液中有某些組分可以影響OD280測(cè)值，求幫忙例舉一些可以影響OD280測(cè)值的化學(xué)試劑 |
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yyy0305
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hgq115: 金幣+50, ★★★很有幫助 2015-12-24 17:33:58
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題主280檢測(cè)的時(shí)候，有用蛋白的緩沖液做blank，扣除背景值嗎,有檢測(cè)320做參比波長(zhǎng)嗎？還有用這種檢測(cè)方法OD值最好控制在0.5上下，不然會(huì)不太準(zhǔn)，OD值和蛋白濃度的換算不同蛋白的系數(shù)不一樣，一般用OD值乘以0.5到1 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
2樓2015-12-17 11:13:49
hc-material
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3樓2015-12-17 11:39:09
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5樓2015-12-17 22:25:36
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7樓2015-12-24 17:34:54
me_zzb 
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【答案】應(yīng)助回帖
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hgq115: 金幣+50, ★★★很有幫助 2016-02-29 15:35:00
hgq115: 金幣+50, ★★★很有幫助 2016-02-29 15:35:00
| 我們以前遇到過(guò)類(lèi)似的情況，您要看一下OD260/OD280的比例，如果大于1，甚至達(dá)到1.5以上，那么樣品里可能會(huì)被核酸污染了，一點(diǎn)點(diǎn)的核酸會(huì)造成很大的OD280吸收值，SDS-PAGE膠肯定檢測(cè)不出來(lái)。供參考。 |
8樓2015-12-25 09:57:28
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9樓2018-08-15 22:50:05
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