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hgq115金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
求助關(guān)于紫外分光光度計(jì)檢測(cè)蛋白OD280 已有3人參與
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| PAGE蛋白電泳結(jié)果顯示無(wú)任何蛋白條帶,紫外分光光度計(jì)檢測(cè)蛋白濃度達(dá)到5.8mg/ml,檢測(cè)樣本緩沖液組分未知,懷疑是緩沖液中有某些組分可以影響OD280測(cè)值,求幫忙例舉一些可以影響OD280測(cè)值的化學(xué)試劑 |
至尊木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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題主280檢測(cè)的時(shí)候,有用蛋白的緩沖液做blank,扣除背景值嗎,有檢測(cè)320做參比波長(zhǎng)嗎?還有用這種檢測(cè)方法OD值最好控制在0.5上下,不然會(huì)不太準(zhǔn),OD值和蛋白濃度的換算不同蛋白的系數(shù)不一樣,一般用OD值乘以0.5到1 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
專(zhuān)家顧問(wèn) (職業(yè)作家)
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專(zhuān)家經(jīng)驗(yàn): +702 |
新蟲(chóng) (初入文壇)
新蟲(chóng) (初入文壇)
金蟲(chóng) (小有名氣)
金蟲(chóng) (小有名氣)
銀蟲(chóng) (初入文壇)
| 我們以前遇到過(guò)類(lèi)似的情況,您要看一下OD260/OD280的比例,如果大于1,甚至達(dá)到1.5以上,那么樣品里可能會(huì)被核酸污染了,一點(diǎn)點(diǎn)的核酸會(huì)造成很大的OD280吸收值,SDS-PAGE膠肯定檢測(cè)不出來(lái)。供參考。 |
新蟲(chóng) (初入文壇)
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