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羅剛木蟲 (小有名氣)
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[求助]
純化蛋白質(zhì)過濾膜的選擇 已有2人參與
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我在為一種藥物做劑型研究，在做溶劑的選擇，客戶要求溶劑溶解了API后溶液要澄清，API是小蛋白質(zhì)類，我拿5% mannitol作為溶劑溶解了API，起初時(shí)候溶液是澄清的，可是過了半個(gè)小時(shí)后溶液開始變渾濁，這是什么原因？ 之后我用過兩種膜過濾，PTFE和PVDF，PTFE過濾后依舊渾濁，但是PVDF過濾后保持澄清，由于我不負(fù)責(zé)做assay的，不能確定過濾后API的量，PVDF過濾后是否API同時(shí)會(huì)被過濾掉？還有為啥PTFE膜過濾了依舊是渾濁？膜的孔徑都是0.2的。 |
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哥本哈根達(dá)斯
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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PVDF膜在使用時(shí)需預(yù)處理，用甲醇處理的目的是活化膜上的正電基團(tuán)，使其更容易與帶負(fù)電的蛋白結(jié)合。也就是說PVDF膜已經(jīng)和你的目標(biāo)蛋白結(jié)合了，所以比較清，你想辦法測(cè)一下濾液中產(chǎn)物的含量��！ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2015-12-26 06:35:59
哥本哈根達(dá)斯
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2樓2015-12-26 06:26:32
4樓2015-12-26 16:26:54
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5樓2016-01-03 08:33:10
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