版塊導(dǎo)航: 正在加載中...

登錄注冊

應(yīng)《網(wǎng)絡(luò)安全法》要求，自2017年10月1日起，未進行實名認證將不得使用互聯(lián)網(wǎng)跟帖服務(wù)。為保障您的帳號能夠正常使用，請盡快對帳號進行手機號驗證，感謝您的理解與支持！

24小時熱門版塊排行榜

返回列表

尋一束光

鐵蟲 (小有名氣)

應(yīng)助: 1 (幼兒園)
金幣: 269.6
紅花: 3
帖子: 134
在線: 40.9小時
蟲號: 3738011
注冊: 2015-03-14
性別: MM
專業(yè): 生物技術(shù)藥物

[求助] α-葡萄糖苷酶活力的測定，哪位大神做過��？？跪求指導(dǎo) 已有1人參與

α-葡萄糖苷酶活力的測定
酶活力單位定義: 37 ℃ ， pH 6. 8 條件下，每 1 min 水解底物產(chǎn)生       1μmol/L 對硝基苯酚的酶量，定義為 1 個酶活力單位 ( U)。
酶活力測定:
   40μL 磷酸鉀緩沖液 ( pH 6. 8) ，加入 0.2 U/mLα-葡萄糖苷酶 20μL， DMSO 40μL，37 ℃ 恒溫 15 min 后加入 2mmol/LPNPG 20μL， 37 ℃ 恒溫反應(yīng) 20 min。再加入 0. 2 mol/L 的Na2 CO3 水溶液 80 μL，于 405 nm 波長下測 A 值。

標(biāo)準(zhǔn)曲線制作根據(jù)采用的反應(yīng)體系，用磷酸緩沖液 ( pH 6. 8) 配制1000
umol/L PNP，稀釋成 400，300， 200， 150， 100， 50， 0umol/L。分別取7 種不同濃度的 PNP 溶液各 20μL，加入40μL 磷酸鉀緩沖液 ( pH 6. 8)  ，蒸餾水20ul,DMSO 40ul,0.2 mol/L  Na2CO3 的水溶液 80 μL，混勻，在 405 nm 下測定A，測 6 組取平均值。以 A 為縱坐標(biāo)Y，對硝基苯酚濃度為橫坐標(biāo)X，做出標(biāo)準(zhǔn)曲線,Y=aX+b。
      根據(jù)酶活力定義得酶活力=200X/40
但是我?guī)氲姆磻?yīng)時間是20分鐘�？墒俏以趺创_定20分鐘酶剛好反應(yīng)完全，如果反應(yīng)時間多余或少于20分鐘，那么測得的酶活力不就不準(zhǔn)了么？
新蟲入行，金幣不多，大家?guī)蛶兔~~

回復(fù)此樓

» 猜你喜歡

全球性的醫(yī)藥交易平臺已經(jīng)有1人回復(fù)
351 藥學(xué)求調(diào)劑已經(jīng)有0人回復(fù)
藥物學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費? 已經(jīng)有269人回復(fù)
N-乙酰半胱氨酸溶液滅菌已經(jīng)有1人回復(fù)
�；鸶咧� 已經(jīng)有25人回復(fù)
求購時間長一些的硝酸釷已經(jīng)有0人回復(fù)

靜心盡力

1樓 2015-12-27 09:58:13

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

乘風(fēng)浮云

新蟲 (正式寫手)

應(yīng)助: 18 (小學(xué)生)
金幣: 4.3
紅花: 5
帖子: 577
在線: 110.9小時
蟲號: 1356438
注冊: 2011-07-26
專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)

【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1

首先你的酶活定義有問題，每 min 水解底物產(chǎn)生1μmol/L 對硝基苯酚的酶量，其中對硝基苯酚應(yīng)該是umol單位。酶活體系中酶量為0.004U，底物量是0.04umol，按照這計算，10min就可以反應(yīng)完，酶活測的是初速度，所以你的反應(yīng)體系中的量肯定是有問題的。測活值也是不準(zhǔn)的

贊一下(1人)

回復(fù)此樓

2樓2015-12-28 14:17:50

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn) 我要訂閱樓主尋一束光的主題更新