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angelyou鐵蟲 (小有名氣)
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[交流]
mix可以擴(kuò)出來的Taq酶擴(kuò)不出來 已有4人參與
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最近用特異性引物做PCR檢測(cè),結(jié)果發(fā)現(xiàn)同樣的PCR條件,同樣的模板和引物, 用擎科的2×MIX(藍(lán)色的)能擴(kuò)出來目的大小的條帶,但是同時(shí)陰性對(duì)照(水做模板)也在目的大小處有弱弱的條帶(已經(jīng)換過新的mix)。 用takara的rTaq酶,卻啥都擴(kuò)不出來了,陽性對(duì)照也沒條帶,用Taq降低了退火溫度又發(fā)現(xiàn)雜帶很多。 大神們,這樣的情況該如何解決,讓陰性擴(kuò)不出來陽性擴(kuò)得出來且沒有雜帶~~~~ |
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The specific primers might contaminant DNA template in traces. Therefore, you should use fresh primers. You can use touchdown PCR for increased specificity and sensitivity in PCR amplificaiton. |
鐵桿木蟲 (著名寫手)
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