 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 10 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2979 | 回復: 9 | ||
wj2423311236銀蟲 (小有名氣)
|
[求助]
關于寶生物xho1酶的連接問題 已有2人參與
|
| 最近在做雙酶切后的連接，連續(xù)兩次了做不出來，使用的酶是bamh1和xho1，其中xho1的說明書上說要用平末端的連接條件，可是bamh1卻又要求黏末端的連接條件。現(xiàn)在很糾結(jié)到底用那個條件。還有平末端的連接條件是什么？新手表示很困擾啊。用的酶是寶生物的，載體是pet28a。 |
回復此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有141人回復
-
蛋白質(zhì)檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
gnice
金蟲 (正式寫手)
- 應助: 6 (幼兒園)
- 金幣: 1573.9
- 散金: 5
- 紅花: 3
- 帖子: 324
- 在線: 154.8小時
- 蟲號: 43496
- 注冊: 2004-04-10
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學
2樓2016-01-13 18:03:24
wj2423311236
銀蟲 (小有名氣)
- 應助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 675.5
- 帖子: 73
- 在線: 20.5小時
- 蟲號: 4215163
- 注冊: 2015-11-12
- 性別: GG
- 專業(yè): 免疫反應相關因子與疾病
3樓2016-01-13 18:19:06
wx1308897716
木蟲 (小有名氣)
神蟲
- 應助: 18 (小學生)
- 金幣: 3176.4
- 散金: 50
- 帖子: 100
- 在線: 136.6小時
- 蟲號: 2806100
- 注冊: 2013-11-16
- 性別: GG
- 專業(yè): 植物生理與生化
4樓2016-01-13 18:51:48
wj2423311236
銀蟲 (小有名氣)
- 應助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 675.5
- 帖子: 73
- 在線: 20.5小時
- 蟲號: 4215163
- 注冊: 2015-11-12
- 性別: GG
- 專業(yè): 免疫反應相關因子與疾病
5樓2016-01-13 19:18:53
lifechuteng
新蟲 (小有名氣)
- 應助: 62 (初中生)
- 金幣: 504.5
- 紅花: 12
- 帖子: 143
- 在線: 38.5小時
- 蟲號: 3948241
- 注冊: 2015-07-01
- 專業(yè): 生物物理、生物化學與分子
【答案】應助回帖
感謝參與，應助指數(shù) +1
|
您可以先將PCR產(chǎn)物連T載體（taq）或者平末端載體（pfu），抽提質(zhì)粒后，再用這兩個酶進行雙酶切， 之后電泳回收目的片段，這樣能夠保證回收到的片段一定是有粘性末端的。連接成功率也會高很多。 若您直接將PCR產(chǎn)物進行酶切，很難保證片段百分百被酶切。并且限制性內(nèi)切酶在DNA末端的酶切效率本身就很低，這種情況必須要添加保護堿基的。 若這兩種酶實在不適合雙酶切，也可以采用分步酶切法，即先單酶切，之后進行產(chǎn)物純化，然后再進行另外一個酶切，之后再純化，這樣的好處是每一次酶切都是相應內(nèi)切酶的最佳反應環(huán)境，但有致命缺點：經(jīng)過多次純化后的DNA片段濃度會很低。 |
6樓2016-01-14 12:48:26
wj2423311236
銀蟲 (小有名氣)
- 應助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 675.5
- 帖子: 73
- 在線: 20.5小時
- 蟲號: 4215163
- 注冊: 2015-11-12
- 性別: GG
- 專業(yè): 免疫反應相關因子與疾病
7樓2016-01-14 17:37:45
8樓2016-01-27 12:03:45
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
9樓2020-12-29 11:15:46
10樓2020-12-31 18:18:58
相關版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 wj2423311236 的主題更新
| 10 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料專業(yè)求調(diào)劑 +5 | hanamiko 2026-03-18 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研]
 271材料工程求調(diào)劑
+4
|
.6lL 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0703化學調(diào)劑，求各位老師收留 +9 | 秋有木北 2026-03-14 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 【同濟軟件】軟件（085405）考研求調(diào)劑 +3 | 2026eternal 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +5 | 陽陽哇塞 2026-03-14 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 314求調(diào)劑 +8 | 無懈可擊的巨人 2026-03-12 | 8/400 |
|
|
|
[考博] 26博士申請 +3 | 1042136743 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料工程專碩調(diào)劑 +5 | 204818@lcx 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工求調(diào)劑 +5 | 緒幸與子 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +3 | 曼殊2266 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703 物理化學調(diào)劑 +3 | 我可以上岸的對?/a> 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0856專碩279求調(diào)劑 +5 | 加油加油！? 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 復試調(diào)劑 +3 | 呼呼？~+123456 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 復試調(diào)劑 +4 | z1z2z3879 2026-03-14 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料與化工（0856）304求B區(qū)調(diào)劑 +6 | 邱gl 2026-03-12 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0856材料與化工301求調(diào)劑 +5 | 奕束光 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0817化學工程與技術(shù)考研312分調(diào)劑 +3 | T123 tt 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 070303一志愿西北大學學碩310找調(diào)劑 +3 | d如愿上岸 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 283求調(diào)劑，材料、化工皆可 +8 | 蘇打水7777 2026-03-11 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑（食品/專碩） +3 | xc321 2026-03-12 | 6/300 |
|