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蕎麥tao新蟲 (小有名氣)
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[求助]
RNA提取過程DNA干擾問題-用于RT-PCR 已有2人參與
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各位好，我提取的植物葉片RNA，用的 the Fruit mate for RNA purification (Takara, China)。提取完也進行了檢測，無DNA雜質(zhì)。 但是發(fā)了文章，審稿專家說Takara公司提取的RNA必須用DNAaseI進行處理。 問題是我沒有樣品了。當初我也進行了DNA檢測，證明了RNA的純度。希望分子這塊的專家能從專業(yè)水平幫我想想該如何進行回復(fù)審稿意見？？ |
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 RNA提取問題解答 |
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2樓2016-01-13 19:16:29
蕎麥tao
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3樓2016-01-13 20:35:46
蕎麥tao4樓2016-01-14 09:28:07
蕎麥tao
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5樓2016-01-16 20:09:57
紫萸香慢001
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請問，我在驗證DNA有無污染的時候，可不可以這樣:新合成的RNA，用普通PCR的含Taq酶的Mix來進行相關(guān)基因的擴增，如果跑膠之后有陽性結(jié)果，是不是說明我提的RNA里面有DNA污染？？這么問題困擾我了好久，希望您能為我解答，謝謝~\(≧▽≦)/~ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
6樓2016-01-16 21:12:06
原來，是這樣
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【答案】應(yīng)助回帖
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不能用跑電泳的方式判斷是否有無DNA殘留，必須要用DNA酶消化，微量的DNA跑膠是看不到的，而且用分光光度計是檢測不出來的，對你反轉(zhuǎn)錄之后的cDNA有幾率產(chǎn)生干擾，所以那個審稿的的確很嚴謹，我們老師也是要求我們必須做DNA的消化。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
7樓2016-01-16 23:20:50
xiaoweiwei121
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