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蕎麥tao新蟲 (小有名氣)
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[求助]
RNA提取過程DNA干擾問題-用于RT-PCR 已有2人參與
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各位好,我提取的植物葉片RNA,用的 the Fruit mate for RNA purification (Takara, China)。提取完也進(jìn)行了檢測(cè),無DNA雜質(zhì)。 但是發(fā)了文章,審稿專家說Takara公司提取的RNA必須用DNAaseI進(jìn)行處理。 問題是我沒有樣品了。當(dāng)初我也進(jìn)行了DNA檢測(cè),證明了RNA的純度。希望分子這塊的專家能從專業(yè)水平幫我想想該如何進(jìn)行回復(fù)審稿意見?? |
RNA提取問題解答 |
新蟲 (小有名氣)
新蟲 (小有名氣)
新蟲 (小有名氣)
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請(qǐng)問,我在驗(yàn)證DNA有無污染的時(shí)候,可不可以這樣:新合成的RNA,用普通PCR的含Taq酶的Mix來進(jìn)行相關(guān)基因的擴(kuò)增,如果跑膠之后有陽性結(jié)果,是不是說明我提的RNA里面有DNA污染??這么問題困擾我了好久,希望您能為我解答,謝謝~\(≧▽≦)/~ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
金蟲 (小有名氣)
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不能用跑電泳的方式判斷是否有無DNA殘留,必須要用DNA酶消化,微量的DNA跑膠是看不到的,而且用分光光度計(jì)是檢測(cè)不出來的,對(duì)你反轉(zhuǎn)錄之后的cDNA有幾率產(chǎn)生干擾,所以那個(gè)審稿的的確很嚴(yán)謹(jǐn),我們老師也是要求我們必須做DNA的消化。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
榮譽(yù)版主 (文壇精英)
這潭水藍(lán)的深邃
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