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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 干擾/敲除 » 原核基因敲除
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921206新蟲 (初入文壇)
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[交流]
原核基因敲除 已有3人參與
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最近剛開始做原核敲除，對質粒進行PCR后DpnI消除模板，結果會有兩條帶，暫且命名為上，和DpnI消化產物，對其都回收后發(fā)現(xiàn)bp相近，那哪個是消化好的呢？求大神指教，圖1左200bp DNA ladder,DpnI消化產物，雙酶切。圖2左MAKER，DpnI膠回收，酶切回收，上回收 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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你問的是質粒構建問題，和敲除無關。 DpnI只是去除模板，跟你產物又無關；位置不同的兩條帶，回收以后又跑到一起啦？如果是這樣，我猜測，上面條帶是你PCR產物DNA結合蛋白比如DpnI或別的什么造成，與下面條帶沒什么區(qū)別，你都收了就好。 如果我理解的不對，你還是去問師姐吧… 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
9212068樓2016-01-15 17:04:29
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