 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 干擾/敲除 » 原核基因敲除
| 查看: 1227 | 回復: 13 | |||
921206新蟲 (初入文壇)
|
[交流]
原核基因敲除 已有3人參與
|
|
最近剛開始做原核敲除，對質(zhì)粒進行PCR后DpnI消除模板，結(jié)果會有兩條帶，暫且命名為上，和DpnI消化產(chǎn)物，對其都回收后發(fā)現(xiàn)bp相近，那哪個是消化好的呢？求大神指教，圖1左200bp DNA ladder,DpnI消化產(chǎn)物，雙酶切。圖2左MAKER，DpnI膠回收，酶切回收，上回收 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
回復此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有120人回復
-
蛋白質(zhì)檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
原海亮
木蟲 (著名寫手)
- 應助: 232 (大學生)
- 金幣: 4607.4
- 散金: 3521
- 紅花: 33
- 帖子: 1804
- 在線: 375.4小時
- 蟲號: 1392705
- 注冊: 2011-09-06
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學
2樓2016-01-15 09:28:41
921206
新蟲 (初入文壇)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 19.5
- 帖子: 30
- 在線: 10.4小時
- 蟲號: 3433608
- 注冊: 2014-09-22
- 性別: MM
- 專業(yè): 獸醫(yī)免疫學
3樓2016-01-15 12:30:22
原海亮
木蟲 (著名寫手)
- 應助: 232 (大學生)
- 金幣: 4607.4
- 散金: 3521
- 紅花: 33
- 帖子: 1804
- 在線: 375.4小時
- 蟲號: 1392705
- 注冊: 2011-09-06
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學
4樓2016-01-15 12:31:53
921206
新蟲 (初入文壇)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 19.5
- 帖子: 30
- 在線: 10.4小時
- 蟲號: 3433608
- 注冊: 2014-09-22
- 性別: MM
- 專業(yè): 獸醫(yī)免疫學
5樓2016-01-15 13:09:53
pursuream
至尊木蟲 (正式寫手)
- 應助: 6 (幼兒園)
- 金幣: 10993.1
- 散金: 10
- 紅花: 5
- 帖子: 651
- 在線: 433.7小時
- 蟲號: 1226621
- 注冊: 2011-03-09
- 性別: GG
- 專業(yè): 基因組學
6樓2016-01-15 13:18:31
921206
新蟲 (初入文壇)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 19.5
- 帖子: 30
- 在線: 10.4小時
- 蟲號: 3433608
- 注冊: 2014-09-22
- 性別: MM
- 專業(yè): 獸醫(yī)免疫學
|
用DpnI消完模板后還要雙酶切，重新構(gòu)建質(zhì)粒，和cas9質(zhì)粒共同導入菌內(nèi)，誘導切割重組，消除質(zhì)粒，然后切掉目的基因，師姐講了一遍，我大概理解這個樣子 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
7樓2016-01-15 13:33:37
pursuream
至尊木蟲 (正式寫手)
- 應助: 6 (幼兒園)
- 金幣: 10993.1
- 散金: 10
- 紅花: 5
- 帖子: 651
- 在線: 433.7小時
- 蟲號: 1226621
- 注冊: 2011-03-09
- 性別: GG
- 專業(yè): 基因組學
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
|
你問的是質(zhì)粒構(gòu)建問題，和敲除無關。 DpnI只是去除模板，跟你產(chǎn)物又無關；位置不同的兩條帶，回收以后又跑到一起啦？如果是這樣，我猜測，上面條帶是你PCR產(chǎn)物DNA結(jié)合蛋白比如DpnI或別的什么造成，與下面條帶沒什么區(qū)別，你都收了就好。 如果我理解的不對，你還是去問師姐吧… 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
9212068樓2016-01-15 17:04:29
原海亮
木蟲 (著名寫手)
- 應助: 232 (大學生)
- 金幣: 4607.4
- 散金: 3521
- 紅花: 33
- 帖子: 1804
- 在線: 375.4小時
- 蟲號: 1392705
- 注冊: 2011-09-06
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學
9樓2016-01-15 17:06:11
921206
新蟲 (初入文壇)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 19.5
- 帖子: 30
- 在線: 10.4小時
- 蟲號: 3433608
- 注冊: 2014-09-22
- 性別: MM
- 專業(yè): 獸醫(yī)免疫學
10樓2016-01-15 22:42:58
相關版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 921206 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 070300化學求調(diào)劑 +5 | 苑豆豆 2026-03-20 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 276求調(diào)劑 +3 | YNRYG 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +3 | 墨墨漠 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 生物學071000 329分求調(diào)劑 +5 | 我愛生物生物愛?/a> 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 269專碩求調(diào)劑 +6 | 金恩貝 2026-03-21 | 6/300 |
|
|
|
[考研]
 一志愿東華大學控制學碩320求調(diào)劑
+3
|
Grand777 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 工科0856求調(diào)劑 +3 | 沐析汀汀 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 【考研調(diào)劑】化學專業(yè) 281分，一志愿四川大學，誠心求調(diào)劑 +11 | 吃吃吃才有意義 2026-03-19 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +3 | 哇呼哼呼哼 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +4 | 某某某某位 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085700資源與環(huán)境308求調(diào)劑 +12 | 墨墨漠 2026-03-18 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 華東師范大學-071000生物學-293分-求調(diào)劑 +3 | 研究生何瑤明 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研]
271材料工程求調(diào)劑
+8
|
.6lL 2026-03-18 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 南京大學化學376求調(diào)劑 +3 | hisfailed 2026-03-19 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿武漢理工材料工程專碩調(diào)劑 +9 | Doleres 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿 西北大學 ，070300化學學碩，總分287，雙非一本，求調(diào)劑。 +4 | 晨昏線與星海 2026-03-19 | 4/200 |
|
|
|
[考研] A區(qū)線材料學調(diào)劑 +5 | 周周無極 2026-03-20 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿南理工085701環(huán)境302求調(diào)劑院校 +3 | 葵梓衛(wèi)隊 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工調(diào)劑 324分 +10 | llllkkkhh 2026-03-18 | 12/600 |
|
|
|
[考研]
11408 一志愿西電，277分求調(diào)劑
+3
|
zhouzhen654 2026-03-16 | 3/150 |
|