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tgifi新蟲 (小有名氣)
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[求助]
求解pcr模板2.7k，P兩端或中間一部分可以出來，p全長時(shí)候只能出來800bp.怎么解救 已有3人參與
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tedaluobo
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重新設(shè)計(jì)引物，擴(kuò)增比目的片段大一些，引物設(shè)計(jì)位置在promoter和終止子后，克隆成功后，再用你之前設(shè)計(jì)的引物擴(kuò)，就能得到目的序列了。 樓主擴(kuò)過中間片段，可以嘗試目的序列分成幾段，然后設(shè)計(jì)一個(gè)特殊的引物，用overlap PCR試試 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2016-01-15 13:08:34
tgifi
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3樓2016-01-15 15:51:06
4樓2016-01-15 15:53:03
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
tgifi: 金幣+5 2016-01-15 15:57:29
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
tgifi: 金幣+5 2016-01-15 15:57:29
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樓主你的問題我也正碰到，好煩心啊 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2016-01-15 15:56:56
6樓2016-01-15 18:53:26
pennchem
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7樓2016-01-16 17:18:40
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兩端和中間括增出來的確定對嗎？已知序列還是怎么？建議如下: 1.通過各種數(shù)據(jù)庫多收集信息，包括優(yōu)化克隆策略（尤其是引物設(shè)計(jì)） 2.實(shí)驗(yàn)需要重復(fù)，比如重新制備模板，優(yōu)化PCR條件（稀釋后續(xù)PCR模板，增加overlap步驟的梯度設(shè)置等） 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
8樓2016-01-18 09:01:38
tgifi
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9樓2016-01-18 23:02:11
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10樓2016-01-18 23:03:17
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