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tgifi新蟲 (小有名氣)
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[求助]
求解pcr模板2.7k,P兩端或中間一部分可以出來,p全長時候只能出來800bp.怎么解救 已有3人參與
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如題,求大神幫忙(≧▽≦) 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
金蟲 (小有名氣)
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重新設(shè)計(jì)引物,擴(kuò)增比目的片段大一些,引物設(shè)計(jì)位置在promoter和終止子后,克隆成功后,再用你之前設(shè)計(jì)的引物擴(kuò),就能得到目的序列了。 樓主擴(kuò)過中間片段,可以嘗試目的序列分成幾段,然后設(shè)計(jì)一個特殊的引物,用overlap PCR試試 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |

新蟲 (小有名氣)
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樓主你的問題我也正碰到,好煩心啊 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
專家顧問 (正式寫手)
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專家經(jīng)驗(yàn): +21 |

新蟲 (正式寫手)
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兩端和中間括增出來的確定對嗎?已知序列還是怎么?建議如下: 1.通過各種數(shù)據(jù)庫多收集信息,包括優(yōu)化克隆策略(尤其是引物設(shè)計(jì)) 2.實(shí)驗(yàn)需要重復(fù),比如重新制備模板,優(yōu)化PCR條件(稀釋后續(xù)PCR模板,增加overlap步驟的梯度設(shè)置等) 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |

新蟲 (小有名氣)
新蟲 (小有名氣)
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