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hekan0825新蟲 (初入文壇)
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[求助]
緊急求助�。�！蛋白凝膠的SDS-PAGE。 已有2人參與
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朋友們，我做蛋白凝膠的SDS-PAGE，可是做了兩次都跑不出來。。。 第一次是把0.3g樣品容到15mL尿緩沖液（內(nèi)含20mM Tris, 8M 尿素，2%SDS和2%β-巰基乙醇，pH=8）,勻漿（10000r/min，5min）,然后煮沸2min，室溫下?lián)u蕩12h，然后用10%的分離膠和3%的濃縮膠。可能是濃度太低，沒有跑出來。 第二次把1g樣品容到10ml尿緩沖液 里，可是還是沒跑出來，堵住了上樣口。 我分析了失敗的三種可能原因： 一是前處理方法不對(duì)； 二是尿緩沖液配制方法不對(duì)，我是將所有東西都稱量好后再定容。pH有8.7多。。。 三是濃度不對(duì)。 請(qǐng)高手指點(diǎn)。金幣雖少，但已傾囊。 |
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cheng0302
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hekan0825(sytucom代發(fā)): 金幣+1, 感謝應(yīng)助，希望繼續(xù)關(guān)注樓主回復(fù)，謝謝 2016-02-23 21:54:08
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電壓多大？電壓調(diào)大試試 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
2樓2016-01-23 14:35:28
fudan671
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hekan0825(sytucom代發(fā)): 金幣+1, 感謝應(yīng)助，希望繼續(xù)關(guān)注樓主回復(fù)，謝謝 2016-02-23 21:54:17
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你初始的配膠怎么樣？然后電壓80跑2個(gè)小時(shí)。正常加樣。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2016-02-13 09:31:31
蛋蛋是顆蛋啊
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4樓2016-09-18 10:47:30
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5樓2016-09-21 15:21:59
robertno
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6樓2016-10-09 14:00:06
crazymouse
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確定下你的測(cè)定方法有沒有什么問題，有些方法在你這里不一定好用，二是濃縮膠濃度變一下試試，然后就是電壓，調(diào)高一點(diǎn)試試，只要不超過120就沒太大問題 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
7樓2017-07-31 22:33:21
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