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hekan0825新蟲 (初入文壇)
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[求助]
緊急求助。!蛋白凝膠的SDS-PAGE。 已有2人參與
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朋友們,我做蛋白凝膠的SDS-PAGE,可是做了兩次都跑不出來。。。 第一次是把0.3g樣品容到15mL尿緩沖液(內(nèi)含20mM Tris, 8M 尿素,2%SDS和2%β-巰基乙醇,pH=8),勻漿(10000r/min,5min),然后煮沸2min,室溫下?lián)u蕩12h,然后用10%的分離膠和3%的濃縮膠?赡苁菨舛忍,沒有跑出來。 第二次把1g樣品容到10ml尿緩沖液 里,可是還是沒跑出來,堵住了上樣口。 我分析了失敗的三種可能原因: 一是前處理方法不對; 二是尿緩沖液配制方法不對,我是將所有東西都稱量好后再定容。pH有8.7多。。。 三是濃度不對。 請高手指點。金幣雖少,但已傾囊。 |
木蟲 (著名寫手)
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你初始的配膠怎么樣?然后電壓80跑2個小時。正常加樣。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
新蟲 (初入文壇)
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電壓多大?電壓調(diào)大試試 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
銀蟲 (初入文壇)
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