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夢(mèng)沁竹香新蟲 (初入文壇)
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[求助]
用Tris-HCl作為緩沖液將蛋白純化，進(jìn)行HPLC，怎么除去Tris-HCl產(chǎn)生的離子峰呢 已有1人參與
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我將自己的基因連在pET29a上，誘導(dǎo)表達(dá)蛋白，破碎時(shí)用Tris-HCl作為緩沖液，將蛋白用Ni柱純化透析后，進(jìn)行酶活反應(yīng)，這個(gè)反應(yīng)需要加FAD,NADH,NADPH,我的產(chǎn)物只溶于水，不溶于二氯甲烷等有機(jī)溶劑，酶反應(yīng)后，我煮沸，直接吸上清過(guò)濾后進(jìn)行HPLC，這樣會(huì)產(chǎn)生很多離子峰，而我的產(chǎn)物出峰時(shí)間和離子峰一樣，這樣怎么辦呢，又不能萃取，怎么才能出去Tris-HCl它們產(chǎn)生的離子峰呢，， 圖片1.png |
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2樓2016-01-23 00:21:18
夢(mèng)沁竹香
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3樓2016-01-23 10:55:02
未老的黃
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4樓2016-01-23 16:28:28
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