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machao8405

木蟲 (正式寫手)

應(yīng)助: 11 (小學(xué)生)
金幣: 6292
帖子: 740
在線: 216.3小時
蟲號: 884679

[交流] DNA loading buffer和RNA loading buffer有啥區(qū)別？

如題，RNA loading buffer除了RNase-Free，還有什么特別的地方？

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1樓 2013-11-17 15:25:08

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userhung

禁蟲 (文學(xué)泰斗)

★ ★ ★ ★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
amisking: 回帖置頂 2013-11-17 19:16:03
amisking: 金幣+3, 鼓勵發(fā)帖交流！ 2013-11-17 19:16:11

10*Loading buffer和6*Loading buffer的區(qū)別

6XLoading Buffer是瓊脂糖/聚丙烯酰胺凝膠電泳用的6倍濃度的核酸樣品用Loading Buffer。向電泳樣品溶液中加入1/6量即可進(jìn)行凝膠電泳。10XLoading Buffer是用于瓊脂糖凝膠電泳的10倍濃度的核酸樣品用Loading Buffer。制品中含有SDS，可即刻停止各種酶促反應(yīng)。向酶促反應(yīng)液中加入1/10量的本制品，即可停止反應(yīng)，此溶液可直接用于瓊脂糖凝膠電泳。
此外，10 X loading buffer 中僅有色素溴酚藍(lán)（Bromophenol Blue)一種染料（濃度0.05%）；6 X loading buffer 中含色素溴酚藍(lán)（Bromophenol Blue)、二甲苯腈藍(lán)FF（Xylene Cyanol FF)兩種染料（濃度都是0.05%），溴酚藍(lán)在瓊脂糖凝膠（0.5% ~ 1.4%）中約與300 bp的雙鏈線狀DNA的遷移速度相同，而二甲苯腈藍(lán)FF則與4 kbp的雙鏈線狀DNA的遷移速度相等

6×Loading buffer:
30mM EDTA
36%(v/v) Glycerol
0.05%(w/v) Xylene Cyanol FF
0.05%(w/v) Bromophenol Blue

主要用于DNA電泳
10×Loading buffer:
30mM EDTA
50%(v/v) Glycerol
0.25%(w/v) Xylene Cyanol FF
0.25%(w/v) Bromophenol Blue
主要用于RNA電泳

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3樓2013-11-17 16:19:09

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soarrow

鐵桿木蟲 (正式寫手)

★ ★ ★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
gyesang: 金幣+2, 鼓勵交流！ 2013-11-17 20:54:12

好像還有甲酰胺還是什么的，目的是為了讓RNA保持線性，否則RNA容易形成二級結(jié)構(gòu)，遷移率就不準(zhǔn)了

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2樓2013-11-17 16:13:59

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

userhung

禁蟲 (文學(xué)泰斗)

★ ★
machao8405(gyesang代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵交流！ 2013-11-17 22:29:27

http://wenku.baidu.com/view/88a7f232eefdc8d376ee328c.html

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4樓2013-11-17 16:19:57

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

164450157

銀蟲 (小有名氣)

應(yīng)助: 4 (幼兒園)
金幣: 267.1
帖子: 276
在線: 16.1小時
蟲號: 2687082

★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
amisking: 歡迎學(xué)術(shù)交流，不鼓勵無厘頭的回帖哦 2013-11-17 19:16:37

祝樓主好運(yùn)連連，心想事成！

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5樓2013-11-17 16:51:22

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