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[交流] DNA loading buffer和RNA loading buffer有啥區(qū)別？

如題，RNA loading buffer除了RNase-Free，還有什么特別的地方？

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1樓 2013-11-17 15:25:08

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soarrow

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好像還有甲酰胺還是什么的，目的是為了讓RNA保持線性，否則RNA容易形成二級(jí)結(jié)構(gòu)，遷移率就不準(zhǔn)了

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2樓2013-11-17 16:13:59

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userhung

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10*Loading buffer和6*Loading buffer的區(qū)別

6XLoading Buffer是瓊脂糖/聚丙烯酰胺凝膠電泳用的6倍濃度的核酸樣品用Loading Buffer。向電泳樣品溶液中加入1/6量即可進(jìn)行凝膠電泳。10XLoading Buffer是用于瓊脂糖凝膠電泳的10倍濃度的核酸樣品用Loading Buffer。制品中含有SDS，可即刻停止各種酶促反應(yīng)。向酶促反應(yīng)液中加入1/10量的本制品，即可停止反應(yīng)，此溶液可直接用于瓊脂糖凝膠電泳。
此外，10 X loading buffer 中僅有色素溴酚藍(lán)（Bromophenol Blue)一種染料（濃度0.05%）；6 X loading buffer 中含色素溴酚藍(lán)（Bromophenol Blue)、二甲苯腈藍(lán)FF（Xylene Cyanol FF)兩種染料（濃度都是0.05%），溴酚藍(lán)在瓊脂糖凝膠（0.5% ~ 1.4%）中約與300 bp的雙鏈線狀DNA的遷移速度相同，而二甲苯腈藍(lán)FF則與4 kbp的雙鏈線狀DNA的遷移速度相等

6×Loading buffer:
30mM EDTA
36%(v/v) Glycerol
0.05%(w/v) Xylene Cyanol FF
0.05%(w/v) Bromophenol Blue

主要用于DNA電泳
10×Loading buffer:
30mM EDTA
50%(v/v) Glycerol
0.25%(w/v) Xylene Cyanol FF
0.25%(w/v) Bromophenol Blue
主要用于RNA電泳

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3樓2013-11-17 16:19:09

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userhung

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http://wenku.baidu.com/view/88a7f232eefdc8d376ee328c.html

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4樓2013-11-17 16:19:57

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祝樓主好運(yùn)連連，心想事成！

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5樓2013-11-17 16:51:22

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zh10246

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我都用一樣的

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6樓2013-11-17 22:59:05

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RNA LOADING BUFFER 主要用于變性膠，DNA LOADING buffer 一個(gè)是顏色指示的作用，一個(gè)是沉淀樣品防止飄樣的作用

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7樓2013-11-19 21:59:01

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malstose

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3樓: Originally posted by userhung at 2013-11-17 16:19:09
10*Loading buffer和6*Loading buffer的區(qū)別

6XLoading Buffer是瓊脂糖/聚丙烯酰胺凝膠電泳用的6倍濃度的核酸樣品用Loading Buffer。向電泳樣品溶液中加入1/6量即可進(jìn)行凝膠電泳。10XLoading Buffer是用于瓊脂糖 ...

小問下，您在上面說的是10 X loading buffer 中僅有色素溴酚藍(lán)（Bromophenol Blue)一種染料，并且含有SDS，但下面的配方中并未顯示啊，依然是兩種染料且沒有SDS��？

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8樓2015-04-02 05:56:43

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lxzk

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2樓: Originally posted by soarrow at 2013-11-17 16:13:59
好像還有甲酰胺還是什么的，目的是為了讓RNA保持線性，否則RNA容易形成二級(jí)結(jié)構(gòu)，遷移率就不準(zhǔn)了

含有甲酰胺的是變性電泳用的，DNA和RNA都要有

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9樓2015-04-02 09:15:23

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下一片海

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二甲苯青和二甲苯腈藍(lán)是一個(gè)東西嗎？

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10樓2017-05-09 13:19:24

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