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yongxiu2008木蟲 (職業(yè)作家)
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[交流]
做過二甲苯致小鼠耳腫脹的蟲友們請進！ 已有2人參與
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想了解一下這個實驗需要注意些什么？ 二甲苯的刺激量是多少呢？ |
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yongxiu2008
木蟲 (職業(yè)作家)
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4樓2017-07-13 07:01:13
yr397391476
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做過。有文獻說用移液器吸取少量的二甲苯滴在小鼠耳廓上讓其慢慢擴散，我們自己在做的時候發(fā)現(xiàn)這樣做出來腫脹度不好且模型不穩(wěn)定。 1、后面用移液器吸取0.05ml的二甲苯，用移液器的針頭輕輕涂抹小鼠右耳朵正反面，這樣會比文獻上面的好點。 2、涂完二甲苯小鼠要放在沒加墊料的籠子里面，不然小鼠會把耳朵往墊料上面蹭。 3、還有一點要注意的是涂完后小鼠不要放在空調(diào)房里，溫度比較低這點很影響它的腫脹度，一般30~40分鐘可達到最大腫脹度，超過90分鐘腫脹消失，所以要在這個時間打打孔稱重。 4、有三種種方法，有的是整個耳朵減下來稱重，有的是耳朵減下來然后用6~8mm的打孔器稱重，有的是不剪耳朵直接打孔稱重。我用的是第二種方法，做出來數(shù)據(jù)還可以。 5、考慮你要做的實驗來選擇不同的致炎物質(zhì)。二甲苯模型主要機制是致使某些炎癥介質(zhì)如組胺、激肽和纖維蛋白溶解釋放，引起局部血管擴張，毛細管通透性增加，炎癥細胞浸潤，造成耳部急性滲出性炎癥水腫。佛波酯誘導(dǎo)的小鼠耳腫脹模型的主要機能誘導(dǎo)小鼠耳組織角質(zhì)形成細胞產(chǎn)生TNF-α,IL-1β等炎癥細胞因子。另外TNF-α的存在會促進繼發(fā)性炎癥細胞因子生成，促使炎性反應(yīng)進一步擴大。刺激磷脂酶誘導(dǎo)AA釋放，代謝成為前列腺素E2(PGE2)和白三烯LTB4，加重炎癥。促進組胺和5-羥色胺的釋放�；ㄉ南┧嵴T導(dǎo)小鼠耳腫脹的機制主要為白三烯和其他脂肪氧化酶介導(dǎo)，而在白三烯存在的情況下前列腺素會促進小鼠耳腫脹。 辣椒素誘導(dǎo)的小鼠耳水腫的形成主要由神經(jīng)肽介導(dǎo)，如降鈣素基因相關(guān)肽、P物質(zhì)、神經(jīng)激肽A和血管活性腸肽。 希望對你有幫助。 |
2樓2014-04-22 13:36:55
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
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你好！我現(xiàn)在要做耳腫脹試驗，小白一枚，有幾個問題想請教一下。1、首先是二甲苯劑量問題。關(guān)于這個我看了很多文獻劑量不一，最低20微升，高的有幾百微升的，因此我做了一個小測試，發(fā)現(xiàn)20微升的二甲苯很快就致腫脹了，40微升的就有一些嚴重了，反而會導(dǎo)致左耳也有腫脹，因此我就選定的是20微升。2、其次是時間間隔問題�？次墨I從涂抹二甲苯到處死小鼠的時間間隔有30分鐘到1小時不等，但我用二甲苯20微升很快小鼠耳朵就紅腫，間隔也就2分鐘左右。3、在以上基礎(chǔ)，我做一次預(yù)實驗，結(jié)果很奇怪陽性對照組反而出現(xiàn)的是陰性結(jié)果，樣品組數(shù)據(jù)也不穩(wěn)定。所以想在這個二甲苯劑量與時間間隔這方便請教一下，不知是否方便可以詳細介紹一下這方面的選擇。 |
3樓2017-07-12 20:55:12
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
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請問是涂抹多長時間之后開始處死的？還有你們這是二甲苯量和時間是怎么確定的？是看參考文獻，還是做了有預(yù)實驗?zāi)�？感謝您的回復(fù) 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2017-07-16 16:59:04
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