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yongxiu2008木蟲 (職業(yè)作家)
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[交流]
做過二甲苯致小鼠耳腫脹的蟲友們請進！ 已有2人參與
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想了解一下這個實驗需要注意些什么？ 二甲苯的刺激量是多少呢？ |
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yongxiu2008
木蟲 (職業(yè)作家)
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4樓2017-07-13 07:01:13
yr397391476
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- 專業(yè): 中藥學其他科學問題
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做過。有文獻說用移液器吸取少量的二甲苯滴在小鼠耳廓上讓其慢慢擴散，我們自己在做的時候發(fā)現這樣做出來腫脹度不好且模型不穩(wěn)定。 1、后面用移液器吸取0.05ml的二甲苯，用移液器的針頭輕輕涂抹小鼠右耳朵正反面，這樣會比文獻上面的好點。 2、涂完二甲苯小鼠要放在沒加墊料的籠子里面，不然小鼠會把耳朵往墊料上面蹭。 3、還有一點要注意的是涂完后小鼠不要放在空調房里，溫度比較低這點很影響它的腫脹度，一般30~40分鐘可達到最大腫脹度，超過90分鐘腫脹消失，所以要在這個時間打打孔稱重。 4、有三種種方法，有的是整個耳朵減下來稱重，有的是耳朵減下來然后用6~8mm的打孔器稱重，有的是不剪耳朵直接打孔稱重。我用的是第二種方法，做出來數據還可以。 5、考慮你要做的實驗來選擇不同的致炎物質。二甲苯模型主要機制是致使某些炎癥介質如組胺、激肽和纖維蛋白溶解釋放，引起局部血管擴張，毛細管通透性增加，炎癥細胞浸潤，造成耳部急性滲出性炎癥水腫。佛波酯誘導的小鼠耳腫脹模型的主要機能誘導小鼠耳組織角質形成細胞產生TNF-α,IL-1β等炎癥細胞因子。另外TNF-α的存在會促進繼發(fā)性炎癥細胞因子生成，促使炎性反應進一步擴大。刺激磷脂酶誘導AA釋放，代謝成為前列腺素E2(PGE2)和白三烯LTB4，加重炎癥。促進組胺和5-羥色胺的釋放�；ㄉ南┧嵴T導小鼠耳腫脹的機制主要為白三烯和其他脂肪氧化酶介導，而在白三烯存在的情況下前列腺素會促進小鼠耳腫脹。 辣椒素誘導的小鼠耳水腫的形成主要由神經肽介導，如降鈣素基因相關肽、P物質、神經激肽A和血管活性腸肽。 希望對你有幫助。 |
2樓2014-04-22 13:36:55
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
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你好！我現在要做耳腫脹試驗，小白一枚，有幾個問題想請教一下。1、首先是二甲苯劑量問題。關于這個我看了很多文獻劑量不一，最低20微升，高的有幾百微升的，因此我做了一個小測試，發(fā)現20微升的二甲苯很快就致腫脹了，40微升的就有一些嚴重了，反而會導致左耳也有腫脹，因此我就選定的是20微升。2、其次是時間間隔問題�？次墨I從涂抹二甲苯到處死小鼠的時間間隔有30分鐘到1小時不等，但我用二甲苯20微升很快小鼠耳朵就紅腫，間隔也就2分鐘左右。3、在以上基礎，我做一次預實驗，結果很奇怪陽性對照組反而出現的是陰性結果，樣品組數據也不穩(wěn)定。所以想在這個二甲苯劑量與時間間隔這方便請教一下，不知是否方便可以詳細介紹一下這方面的選擇。 |
3樓2017-07-12 20:55:12
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
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請問是涂抹多長時間之后開始處死的？還有你們這是二甲苯量和時間是怎么確定的？是看參考文獻，還是做了有預實驗呢？感謝您的回復 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2017-07-16 16:59:04
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