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yongxiu2008木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
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[交流]
做過(guò)二甲苯致小鼠耳腫脹的蟲(chóng)友們請(qǐng)進(jìn)！ 已有2人參與
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想了解一下這個(gè)實(shí)驗(yàn)需要注意些什么？ 二甲苯的刺激量是多少呢？ |
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yr397391476
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做過(guò)。有文獻(xiàn)說(shuō)用移液器吸取少量的二甲苯滴在小鼠耳廓上讓其慢慢擴(kuò)散，我們自己在做的時(shí)候發(fā)現(xiàn)這樣做出來(lái)腫脹度不好且模型不穩(wěn)定。 1、后面用移液器吸取0.05ml的二甲苯，用移液器的針頭輕輕涂抹小鼠右耳朵正反面，這樣會(huì)比文獻(xiàn)上面的好點(diǎn)。 2、涂完二甲苯小鼠要放在沒(méi)加墊料的籠子里面，不然小鼠會(huì)把耳朵往墊料上面蹭。 3、還有一點(diǎn)要注意的是涂完后小鼠不要放在空調(diào)房里，溫度比較低這點(diǎn)很影響它的腫脹度，一般30~40分鐘可達(dá)到最大腫脹度，超過(guò)90分鐘腫脹消失，所以要在這個(gè)時(shí)間打打孔稱重。 4、有三種種方法，有的是整個(gè)耳朵減下來(lái)稱重，有的是耳朵減下來(lái)然后用6~8mm的打孔器稱重，有的是不剪耳朵直接打孔稱重。我用的是第二種方法，做出來(lái)數(shù)據(jù)還可以。 5、考慮你要做的實(shí)驗(yàn)來(lái)選擇不同的致炎物質(zhì)。二甲苯模型主要機(jī)制是致使某些炎癥介質(zhì)如組胺、激肽和纖維蛋白溶解釋放，引起局部血管擴(kuò)張，毛細(xì)管通透性增加，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，造成耳部急性滲出性炎癥水腫。佛波酯誘導(dǎo)的小鼠耳腫脹模型的主要機(jī)能誘導(dǎo)小鼠耳組織角質(zhì)形成細(xì)胞產(chǎn)生TNF-α,IL-1β等炎癥細(xì)胞因子。另外TNF-α的存在會(huì)促進(jìn)繼發(fā)性炎癥細(xì)胞因子生成，促使炎性反應(yīng)進(jìn)一步擴(kuò)大。刺激磷脂酶誘導(dǎo)AA釋放，代謝成為前列腺素E2(PGE2)和白三烯LTB4，加重炎癥。促進(jìn)組胺和5-羥色胺的釋放。花生四烯酸誘導(dǎo)小鼠耳腫脹的機(jī)制主要為白三烯和其他脂肪氧化酶介導(dǎo)，而在白三烯存在的情況下前列腺素會(huì)促進(jìn)小鼠耳腫脹。 辣椒素誘導(dǎo)的小鼠耳水腫的形成主要由神經(jīng)肽介導(dǎo)，如降鈣素基因相關(guān)肽、P物質(zhì)、神經(jīng)激肽A和血管活性腸肽。 希望對(duì)你有幫助。 |
2樓2014-04-22 13:36:55
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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你好！我現(xiàn)在要做耳腫脹試驗(yàn)，小白一枚，有幾個(gè)問(wèn)題想請(qǐng)教一下。1、首先是二甲苯劑量問(wèn)題。關(guān)于這個(gè)我看了很多文獻(xiàn)劑量不一，最低20微升，高的有幾百微升的，因此我做了一個(gè)小測(cè)試，發(fā)現(xiàn)20微升的二甲苯很快就致腫脹了，40微升的就有一些嚴(yán)重了，反而會(huì)導(dǎo)致左耳也有腫脹，因此我就選定的是20微升。2、其次是時(shí)間間隔問(wèn)題�？次墨I(xiàn)從涂抹二甲苯到處死小鼠的時(shí)間間隔有30分鐘到1小時(shí)不等，但我用二甲苯20微升很快小鼠耳朵就紅腫，間隔也就2分鐘左右。3、在以上基礎(chǔ)，我做一次預(yù)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果很奇怪陽(yáng)性對(duì)照組反而出現(xiàn)的是陰性結(jié)果，樣品組數(shù)據(jù)也不穩(wěn)定。所以想在這個(gè)二甲苯劑量與時(shí)間間隔這方便請(qǐng)教一下，不知是否方便可以詳細(xì)介紹一下這方面的選擇。 |
3樓2017-07-12 20:55:12
yongxiu2008
木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
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4樓2017-07-13 07:01:13
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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請(qǐng)問(wèn)是涂抹多長(zhǎng)時(shí)間之后開(kāi)始處死的？還有你們這是二甲苯量和時(shí)間是怎么確定的？是看參考文獻(xiàn)，還是做了有預(yù)實(shí)驗(yàn)?zāi)�？感謝您的回復(fù) 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
5樓2017-07-16 16:59:04
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